EcoR I
MCE 国际站：EcoR I
品牌：MedChemExpress (MCE)
存储条件： -20°C 两年
简介：EcoR I 是经过基因工程重组的快速限制性内切酶，适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。EcoR I 的同裂酶有：Fun II。
概述：EcoR I 是经过基因工程重组的快速限制性内切酶，适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。EcoR I 的同裂酶有：Fun II。本产品含通用的 Buffer 和 Color Buffer，其中 Color Buffer 含红色和黄色示踪染料，酶切产物可直接用于凝胶电泳。Color Buffer 的红色染料与 2500 bp 双链DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与 10 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。
描述：
• EcoR I 在 10× 缓冲液 和 10× 显色缓冲液 中 100% 有效。10× 显色缓冲液包含密度试剂以及红色和黄色示踪染料，可直接将反应混合物加载到凝胶上。显色缓冲液的红色染料与 1% 琼脂糖凝胶中的 2500 bp DNA 片段一起迁移，而显色缓冲液的黄色染料比 1% 琼脂糖凝胶中的 10 bp DNA 片段迁移得更快。
• 切割位点：
5'…G▼A A T T C…3'
3'…C T T A A▲G…5'
操作说明：1. DNA 快速酶切流程1.1 在冰上配制反应体系注：若底物 DNA 为 PCR 产物，建议使用经纯化的 PCR 产物。若使用未经纯化的 PCR 产物，可将 10× Buffer 或 10× Color Buffer 减少至 2 μL。1.2 轻轻吸打或轻弹管壁混匀反应液。切勿涡旋。瞬时离心收集挂壁液滴。1.3 对于质粒 DNA，37°C 孵育 15 min；对于 PCR 产物，37°C 孵育 15~30 min；对于基因组 DNA，37°C 孵育 30~60 min。1.4 （可选步骤）酚氯仿抽提或柱纯化。1.5 若使用 10× Color Buffer，酶切产物可以直接进行上样电泳。2. 适用于质粒 DNA 的扩大反应体系注：若总反应体系大于 20 μL，可适当增加孵育时间，尽量使用水浴、金属浴或沙浴。
注意事项：1. 若进行双酶切或多酶切，每种快速内切酶的用量为 1 μL，且所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的 1/10。可根据需要适当扩大反应体系。2. 若同时使用的几种快速内切酶的最适反应温度不同，则应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，并在其最适反应温度下进行酶切。3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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