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2024/10/12 14:38:50红细胞裂解液是一种去除红细胞简便易行的方法,即用裂解液裂解红细胞,它既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。
原理说明
利用细胞内外的离子浓度差异,形成渗透压差,外部的水分会扩散至细胞内,使红细胞膨胀,达到裂解的效果。
使用方法
1.裂解红细胞
(1) 向 1 份待裂解的新鲜全血中加入 3 倍体积的红细胞裂解液(如 1mL 新鲜全血加入 3mL 红细胞裂解液)轻轻涡旋或颠倒混匀。【注】:如果对新鲜组织细胞进行处理需经胰酶等消化成单个细胞悬液后离心收集细胞后再进行后续操作。
(2) 冰上孵育 15 min,其间轻轻涡旋混匀 2 次。【注】:红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。
2.收集白细胞
(1)在 4℃,450×g 离心 10 min 收集白细胞,小心吸弃上清液。
(2) 向以上沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞(例如起始血液为 1 mL,则加入 2 mL 的红细胞裂解液)。
(3) 在 4℃,450×g 离心 10 min 收集白细胞,小心并吸去上清液。
(4) 重悬细胞,用于后续实验。【注】:如提取 RNA,最好从此步开始使用无 RNase 的溶液进行。
红细胞裂解液产品
[名称] 李记生物
[名称] 红细胞裂解液
[货号] AP01L106
[规格] 100mL