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延长ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色谱柱使用寿命的技巧

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2024/10/31 8:27:54

1. 为了尽可能延长ACQUITY UPLCACQUITY Premier CSH色谱柱的使用寿命,请密切关注以下方面

水的品质(包括水纯化系统)

●溶剂品质

●流动相的制备、储存和使用期限

●样品、缓冲盐和流动相的溶解性

●样品质量及其前处理

2. 出现问题时,往往只需要纠正一个不当的操作。

3. 请务必记住:

●使用在线过滤器装置,或者优选VanGuard保护柱

●尽可能避免使用100%水相流动相,以阻止细菌滋生

●每24~48小时更换一次水相流动相(如果必须使用100%水相流动相)

●每24~48小时需将旧的100%水相流动相丢弃以阻止细菌滋生

●每次向流动相A添加5%~10%有机溶剂,以调节梯度曲线

●用0.2μm滤膜过滤流动相的水相部分

●维护水纯化系统,使其保持良好的工作状态。

●尽可能只使用超纯水(18 MΩ•cm)和优质溶剂。使用HPLC级水,而不是UPLC级水。

●考虑样品前处理(如固相萃取、过滤等)。

4. 避免事项(在可能的情况下):

100%水相流动相(如果可能)

HPLC级瓶装水

●“直接加装”流动相

●使用旧置的水相流动相。切记每24~48小时彻底冲洗流动相储液瓶,并制备新鲜流动相

●磷酸盐缓冲液与高浓度乙腈(如 > 70%)一起使用,可能会出现沉淀

5. 请勿在观察到背压过高或峰分裂时便认定是由于色谱柱失效所引起:

●调查色谱柱出现故障的原因

●柱压

●流动相是否长菌、沉淀析出和/或样品的问题

●峰分叉

●样品质量

●进样溶剂的强度

6. 请牢记:通常UPLC流速较低,因此流动相消耗会慢很多(请仅制备所需的流动相或将多余的流动相冷藏保存)。

7. 流动相相关问题:

●是否在使用100%水相流动相?能否在流动相A中加入少量有机溶剂?

●是否要使用0.2 ­m滤膜过滤水相流动相?

●流动相配了多久?是否需要在储液瓶上注明制备日期?

●每24~48小时需添加流动相还是制备新鲜流动相?

●水的质量如何?水的质量最近有变化吗?水纯化系统是如何工作的?上一次维护是什么时候?

●是否在使用pH 7的磷酸盐缓冲液(在此条件下非常容易滋生细菌)?

8. 样品相关问题:

如果以流动相配制的纯标准品进样,是否会出现这些问题?

●如果按照样品前处理方法(如SPE、过滤等)用水

●制备标准品,是否仍会出现这些问题?

●样品是否随时间发生了变化?


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