技术文章

主要用途

植物细胞壁钙荧光白荧光染色试剂是一种经典的技术方法，旨在通过荧光染色剂钙荧光白与细胞壁中的纤维素和壳多糖结合，产生荧光，从而检测植物细胞壁的生成变化。该技术经过精心研制和成功实验证明，可用于显示植物细胞壁的生成变化和原生质体细胞的鉴定。产品严格无菌，即到即用，操作简易，支持活体检测，性能稳定。

技术背景

钙荧光白（Calcofluor white；CFW）是一种非特异性荧光增亮染料，能够结合β-链接的糖苷，如纤维素（cellulose）和壳多糖（chitin）等。在植物生物学中，钙荧光白用于显示藻类和高等植物中细胞壁生物合成过程中的细胞壁生成变化，以及原生质体细胞的鉴定。

产品内容

• 清理液（Reagent A）：XX毫升

• 染色液（Reagent B）：XX微升

• 产品说明书：1份

保存方式

• 保存染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，严格避免光照。

• 其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6个月。

用户自备

• 1.5毫升离心管：用于细胞染色的容器

• 微型台式离心机：用于沉淀细胞

• （共聚焦）荧光显微镜：用于观察荧光细胞

实验步骤

1. 准备1管待测植物细胞或原生质体细胞（1 × 10^7细胞/毫升）。

2. 移取100微升悬浮细胞到1.5毫升离心管。

3. 加入XX微升染色液（Reagent B），混匀。

4. 室温下孵育5分钟，避免光照。

5. 放进微型台式离心机离心5分钟，速度为1000g。

6. 小心抽去上清液。

7. 加入XX微升清理液（Reagent A），轻柔混匀细胞颗粒群。

8. 放进微型台式离心机离心5分钟，速度为1000g。

9. 小心抽去上清液。

10. 重复实验步骤7至9二次。

11. 加入XX微升清理液（Reagent A），轻柔混匀细胞颗粒群。

12. 移取10微升上述细胞悬液到载波片上，盖上盖玻片。

13. 使用（共聚焦）荧光显微镜观察：激发波长355nm，散发波长440nm——细胞壁显示强烈蓝色荧光。

注意事项

1. 本产品为20次操作。

2. 操作时，须戴手套。

3. 操作时，须无菌操作，避免污染母液。

4. 孵育时，必须避免光照。

5. 建议细胞染色完成后，即刻进行细胞荧光分析。

6. 本公司提供系列植物细胞分析试剂产品。

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定。

2. 本产品经鉴定荧光清晰。