人表皮永生化细胞HACAT是一种重要的研究工具,广泛应用于皮肤生物学和分化研究领域。以下是对HACAT细胞的详细介绍:
1、细胞来源:HACAT细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤组织。
2、细胞特性:HACAT细胞保留了角质形成细胞的分化能力,与正常人角质形成细胞分化特性相似,可以繁殖超过150代,但不具有肿瘤特性。该细胞在显微镜下呈典型上皮细胞样,角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白表达呈阳性。
3、培养条件:人表皮永生化细胞HACAT细胞推荐使用DMEM培养基,含有10%的FBS,在37度、5%CO2培养箱中培养。此外,还可以使用89%MEM(abs9503)+10%胎牛血清优级(abs972)+1%双抗(abs9244)+0.2%牛脑垂体提取物(abs9119)作为营养体系。
4、注意事项:HACAT细胞较难消化,胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚红消化时间可能需要5min或更久,具体时间因细胞不同分化程度和融合度而异。传代时建议按1:3至1:5的比例进行,传代周期通常为2-3天。如果细胞长满后没有及时传代,任其过度生长,可能造成不可逆转的损伤。
总的来说,人表皮永生化细胞HACAT细胞作为一种重要的研究工具,在皮肤生物学和分化研究领域发挥着重要作用。