前言
在国家药典委修订的2025年版《中国药典》标准草案中，黄芪和槟榔标准草案中增订了赭曲霉毒素A的检查项。在修订草案的公示稿中对于供试品的制备，与2020年版《中国药典》2351赭曲霉毒素A测定法中供试品溶液的制备有较大差异，差异如下：
本次实验参考了2025年版《中国药典》黄芪和槟榔的修订草案公示稿，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置荧光检测器进行检测。实验结果显示，理论塔板数以赭曲霉毒素A峰算远高于药典要求4000，目标峰周围无杂峰，满足系统适用性试验要求。对照品赭曲霉毒素A保留时间重复性RSD为0.075%，峰面积重复性为0.421%，重复性较好。曲线测试R值在0.999以上。赭曲霉毒素A的检出限为2.366ng。以上数据均满足药典方法的要求。
关键词：黄芪；槟榔；高效液相色谱法；荧光检测器；赭曲霉毒素A。
1 实验方法
1.1 仪器配置
1.２实验材料及辅助设备
乙腈：色谱纯；
甲醇：色谱纯；
冰乙酸：优级纯；
赭曲霉毒素A标准品：100mg/L；
聚山梨酯20：分析纯；
氯化钠：优级纯；
磷酸氢二钠：优级纯；
磷酸二氢钾：优级纯；
氯化钾：优级纯；
盐酸：优级纯；
赭曲霉毒素A免疫亲和柱；
离心机。
1.3测试条件
1.4溶液配制
1.4.1 PBS缓冲液
称取氯化钠8.0g、磷酸氢二钠1.2g、磷酸二氢钾0.2g、氯化钾0.2g，加水990mL使溶解，用盐酸调节pH值至7.0，加水稀释至1000mL，即得。
1.4.2 聚山梨酯20 PBS缓冲液
取聚山梨酯20 1.0mL，加PBS缓冲液稀释至1000mL，即得。
1.4.3对照品溶液
精密量取赭曲霉毒素A对照品适量，用甲醇制成浓度为每1mL含2.5ng的溶液，即得。
1.4.4供试品溶液的制备
取供试品粉末约3g，精密称定，置于均质瓶中，加入氯化钠3g，精密加入70%甲醇60mL，离心10分钟（离心速度8000r/min），精密量取上清液5mL，置于50mL量瓶中，用PBS缓冲液稀释至刻度，摇匀，离心15分钟（离心速度8000r/min），精密量取上清液20mL，通过免疫亲和柱，流速每分钟3mL，用聚山梨酯20 PBS缓冲液10mL冲洗，弃去洗脱液，使空气进入柱子，再用水10mL洗脱，流速每分钟6mL，弃去洗脱液，使空气进入柱子，将水挤出柱子，再用甲醇1.5mL洗脱，收集洗脱液，置2mL量瓶中，并用水稀释至刻度。
２ 结果与讨论
２.1 系统适用性
说明：由上述谱图可见，理论塔板数以赭曲霉毒素A峰算远高于药典要求4000，目标峰周围无杂峰，满足系统适用性试验要求。
２.２ 对照品重复性测试
说明：由上表数据可知，赭曲霉毒素A保留时间重复性RSD为0.075%，峰面积重复性为0.421%，重复性较好，满足实验要求。
2.3 曲线测试
说明：赭曲霉毒素A对照品浓度为2.5μg/L，分别进样5μL，10μL，15μL，20μL，25μL。由上图数据可知，曲线方程R值为0.999以上，满足实验要求。
2.4 检出限测试
说明：由上表数据可知，赭曲霉毒素A浓度为2.5μg/L，进样量5μL，可得进样质量为12.5ng。由三倍信噪比为检出限可得赭曲霉毒素A的检出限为2.366ng。满足实验要求。
2.5 黄芪和槟榔测试结果
说明：由黄芪加标谱图中可以表明，黄芪谱图中的峰不是赭曲霉毒素A，黄芪和槟榔中未检测出赭曲霉毒素A，且在空白实验及空白前处理实验也未检测出未知峰，黄芪和槟榔谱图中的未知峰应是样品中未知物。
2.6 注意事项
1. 免疫亲和柱需在2-8℃冰箱中保存，不可冷冻；
2. 赭曲霉毒素A标准品需在-20±5℃下保存。
３ 结论
本次实验参考了2025年版《中国药典》黄芪和槟榔的修订草案公示稿，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置荧光检测器进行检测。实验结果显示，理论塔板数以赭曲霉毒素A峰算远高于药典要求4000，目标峰周围无杂峰，满足系统适用性试验要求。对照品赭曲霉毒素A保留时间重复性RSD为0.075%，峰面积重复性为0.421%，重复性较好。曲线测试R值在0.999以上。赭曲霉毒素A的检出限为2.366ng。以上数据均满足药典方法的要求。
