固相萃取小柱是一种用于样品前处理和分离的常见技术。在实验室分析中，随着使用次数的增加，SPE小柱可能会逐渐失效或性能下降，因此定期更换是保证实验结果准确性和可靠性的关键。以下是固相萃取小柱的更换方式：
1. 判断是否需要更换
- 回收率降低：如果在一段时间内，目标化合物的回收率明显下降，这可能表明小柱的吸附能力在减弱。可以通过加标回收实验来监测回收率，即在已知浓度的样品中添加标准物质，然后通过SPE处理和检测，计算出回收率。如果回收率显著低于预期值，则表明小柱可能需要更换。
- 填料堵塞：如果SPE小柱中的填料被样品中的颗粒物或其他杂质堵塞，会导致流速减慢或完全阻塞。这不仅影响实验效率，还可能导致目标化合物无法有效分离和纯化。可以通过观察样品加载和洗脱过程中的流速变化来判断。如果流速显著减慢或出现背压过高的情况，很可能是填料堵塞，此时需要考虑更换小柱。
- 柱内压力升高：在使用SPE小柱时，柱内压力是一个重要参数。正常情况下，压力应保持在一定范围内。如果发现柱内压力逐渐升高，可能是由于填料的孔隙被堵塞或填料本身发生了物理变化。这种情况不仅影响流速和分离效果，还可能损坏设备，因此需要及时更换小柱。
- 目标化合物洗脱不完全：如果在使用过程中发现目标化合物未能完全从SPE小柱中洗脱出来，可能是由于填料的吸附性能下降或洗脱条件不适当。通过优化洗脱溶剂和条件仍无法解决问题时，可以考虑是小柱的吸附性能下降，需要更换新的SPE小柱。
- 填料颜色变化：SPE小柱的填料颜色变化也可能指示其状态。长期使用或处理复杂样品后，填料颜色可能会因吸附了大量杂质而变色。如果填料颜色明显变深或变黑，通常意味着填料已经饱和或被污染，需要更换。
- 验证实验：定期进行验证实验是判断SPE小柱性能的有效方法。可以采用已知浓度和成分的标准样品进行SPE处理，然后检测结果是否符合预期。如果多次验证实验结果稳定且符合标准，则小柱性能良好；反之，如果结果波动较大或不符合标准，则需考虑更换小柱。
- 对照实验：对照实验也是判断小柱失效的方法之一。可以同时使用一根新的SPE小柱和怀疑失效的小柱处理相同的样品，然后比较两者的回收率、流速和洗脱效果。如果新小柱的表现明显优于旧小柱，则说明旧小柱可能已经失效，需要更换。
- 维护记录：保持详细的使用和维护记录也是重要的一环。记录每次使用小柱的样品类型、处理量、使用次数和任何异常情况，有助于预测小柱的使用寿命并及时更换。
2. 准备新的SPE小柱
- 选择合适的SPE小柱型号和规格，根据实验需求确定所需的填料类型和尺寸。
- 确保新小柱的包装完整无损，避免在运输过程中受到污染或损坏。
3. 安装新的SPE小柱
- 将新的SPE小柱安装在固相萃取装置上，确保连接紧密无泄漏。
- 根据实验要求调整流速和压力等操作参数。
4. 活化新的SPE小柱
- 在使用新的SPE小柱之前，需要进行活化处理以去除填料表面的杂质和增强填料的亲疏水性。活化方法有多种，例如用醇或溶剂冲洗、用酸或碱溶液处理、用热气体裂解等。
- 通常情况下，先用一种溶剂冲洗小柱以去除可能存在的污染物，然后用另一种溶剂进一步活化填料。
5. 上样
- 将待处理的样品缓慢地加入新的SPE小柱中。注意控制样品的流速，确保目标化合物有足够的时间与填料相互作用。
- 在上样过程中，可以加入缓冲剂或其他调节剂以优化萃取效果。
6. 淋洗
- 上样完成后，使用适当的洗涤剂或其他溶液清洗小柱填料。这一步的目的是移除杂质和干扰物，使填料表面只留下目标化合物。
- 选择合适的洗涤剂对于提高萃取效率至关重要。
7. 洗脱目标化合物
- 最后一步是用合适的溶剂将目标化合物从小柱填料表面洗脱出来。洗脱溶剂需要与填料表面的目标化合物亲和力强，以满足高效洗脱的需求。
- 收集洗脱液并进行后续分析。
8. 记录和评估
- 在整个过程中，详细记录每一步的操作条件和结果。这些数据对于评估新小柱的性能和使用寿命非常重要。
- 如果发现新小柱的性能不如预期，应及时检查原因并采取相应措施。
