牛血清白蛋白（BSA）是一种在肝脏中合成的可溶性单体蛋白（66.5 kDa）。牛血清白蛋白可以稳定细胞外液体积，是多种小分子（包括血清中的类固醇、脂肪酸和甲状腺激素）的载体。此外，BSA 可以作为抗氧化剂，捕获有害的自由基。
牛血清白蛋白在细胞培养中有什么用途呢？
在细胞培养基中补充牛血清白蛋白可以促进细胞生长和存活，尤其是在使用无血清培养基时。牛血清白蛋白结合培养基中存在的基本分子（例如脂肪酸、激素、肽），可以将这些分子有效输送到培养细胞中。BSA 的抗氧化特性还可以减少细胞压力和损伤。
1）用作蛋白质鉴定的标准
2）在免疫测定中用作封闭试剂
3）作为稳定成分添加到限制性酶切反应中
4）添加到抗体溶液中，以提高抗体稳定性和寿命
5）补充到细胞培养基中以增强营养
另外牛血清白蛋白也常用于免疫测定中的封闭，包括 ELISA 和免疫印迹。作为一种单一蛋白质，与牛奶（一种复杂的蛋白质混合物）相比，BSA 不太可能表现出与抗体的交叉反应性。此外，一般未磷酸化的 BSA 通常用于涉及抗磷蛋白抗体的测定。抗磷蛋白抗体可能与牛奶封闭剂（即酪蛋白）中的磷酸化蛋白非特异性结合。然而，抗磷蛋白抗体不太可能与 BSA 结合，从而降低背景。
牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin, BSA）在生物化学、分子生物学、免疫学、细胞培养和药物研发等领域有广泛的应用。以下是其主要应用场景的详细说明：
- 应用原理：BSA常用于蛋白质定量实验（如Bradford法、Lowry法、BCA法）中作为标准品，用于绘制标准曲线。
- 原因：BSA具有稳定的分子量（约66.5 kDa）和已知的浓度，且易于溶解。
- 实验示例：在Bradford法中，BSA与染料结合后产生颜色变化，通过比色法测定未知样品的蛋白质浓度。
- 应用原理：在ELISA、Western blot、免疫荧光等实验中，BSA用于封闭非特异性结合位点，减少背景信号。
- 原因：BSA能够非特异性地结合到实验表面（如微孔板或膜），防止抗体或其他试剂非特异性吸附。
- 实验示例：在Western blot中，BSA封闭膜上的非特异性位点，提高目标蛋白检测的特异性。
- 应用原理：在细胞培养基中添加BSA，作为营养补充剂和稳定剂。
- 原因：BSA能够结合和运输脂肪酸、激素等营养物质，促进细胞生长，同时保护细胞免受机械损伤或氧化应激。
- 实验示例：在干细胞培养或原代细胞培养中，BSA常用于提高细胞存活率。
- 应用原理：在酶反应体系中加入BSA，用于稳定酶的活性。
- 原因：BSA能够减少酶在反应中的失活，防止酶与反应管壁的非特异性结合。
- 实验示例：在PCR反应中，BSA常用于稳定DNA聚合酶，提高扩增效率。
- 应用原理：BSA作为载体蛋白，用于提高药物的溶解性、稳定性和生物利用度。
- 原因：BSA能够与疏水性药物结合，形成稳定的复合物，延长药物在体内的半衰期。
- 实验示例：在纳米药物递送系统中，BSA包裹药物分子，提高靶向性和治疗效果。
- 应用原理：BSA用于修饰生物传感器表面，提高检测灵敏度和特异性。
- 原因：BSA能够非特异性地结合到传感器表面，减少非目标分子的干扰。
- 实验示例：在血糖检测试纸中，BSA用于修饰电极表面，提高检测准确性。
7. 蛋白质结晶中的添加剂
- 应用原理：在蛋白质结晶实验中，BSA作为添加剂用于优化结晶条件。
- 原因：BSA能够稳定蛋白质结构，促进晶体形成。
- 实验示例：在X射线晶体学中，BSA用于提高目标蛋白的结晶成功率。
- 应用原理：BSA作为诊断试剂中的稳定剂或稀释剂，用于提高试剂的稳定性和一致性。
- 原因：BSA能够保护诊断试剂中的活性成分（如抗体或酶）免受降解。
- 实验示例：在ELISA试剂盒中，BSA用于稀释抗体或酶标物。
- 应用原理：BSA作为疫苗佐剂，用于增强免疫反应。
- 原因：BSA能够与抗原结合，提高抗原的稳定性和免疫原性。
- 实验示例：在某些疫苗研发中，BSA与抗原结合后注射，增强机体的免疫应答。
- 应用原理：BSA用于修饰生物材料表面，减少非特异性吸附。
- 原因：BSA能够覆盖材料表面，防止蛋白质或细胞非特异性结合。
- 实验示例：在医疗器械表面涂覆BSA，减少血液或组织中的蛋白质吸附。
