上海鼎杰生物科技有限公司
2012/7/18 8:56:45 一、电炉隔水加热法
(1) 将薄小(10X10X2mm)的组织放入40%甲醛的小烧杯中,烧开10秒,然后移去酒精灯,再固定1分钟
(2) 用手术刀将组织修成1毫米左右厚的薄片,再放回40%的甲醛(热)溶液内1分钟
(3) 将组织取出,水洗
(4) 用滤纸压干组织中的水份
(5) 再放入水浴的纯丙酮中4~6分钟(中间更换一次丙酮)水温控制在70℃左右
(6) 轻压组织有弹性感后,放入60~70℃的石蜡中浸蜡5分钟
(7) 用加热的电烙铁将组织嵌入事先准备好的空蜡块中,用载玻片压平组织,放在冰上冷却
(8) 常规石蜡切片,轻轻的将蜡块修至组织面*暴露后,切片,切片厚度4~5微米,修片时不能修的太厚,否则组织容易蹦出。
(9) 将切片捞于载玻片后加热烤片10~15秒,烤片温度不宜超过80℃,更不能将组织烤焦,可边烤边用湿布磨擦载玻片反面降温
(10) 快速放入二甲苯快速脱蜡(2道),梯度酒精洗,入水
(11) 苏木素滴加在载玻片上,加热1~2分钟(60℃左右,不能将苏木素烧开,以防切片脱落)
(12) 水洗
(13) 盐酸酒精分化1秒钟
(14) 水洗,温水蓝化
(15) 伊红2~5秒钟
(16) 梯度酒精快速脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
注意事项:由于丙酮极易挥发燃烧,使用电炉隔水加热法必须时刻注意安全
二、超声波快速处理仪法
(1) 先将超声波快速处理仪开机预热至70℃
(2) 将薄小(10X10X2mm)的组织放入40%的甲醛或AAF液的小烧杯中超声处理4分钟
(3) 用手术刀将组织修成1毫米左右厚的薄片,再放回固定液内2分钟
(4) 取出组织,水洗10秒钟,放在滤纸上吸干
(5) 放入纯丙酮中超声处理2~3分钟,取出组织,放在滤纸上吸干,再放入纯丙酮4~6分钟,直至组织上浮
(6) 放入二甲苯中超声处理3分钟
(7) 放入熔融的石蜡中(70℃)超声处理5分钟,可用镊子轻压组织,直至无气泡产生
(8) 用加热的电烙铁或镊子将组织嵌入事先准备好的空蜡块中,用载玻片压平组织,放在冰上冷却
(9) 常规石蜡切片,轻轻的将蜡块修至组织面*暴露后,切片,切片厚度4~5微米
(10)
将切片捞于载玻片后加热烤片10~15秒,烤片温度不宜超过80℃,更不能将组织烤焦,可边烤边用湿布磨擦载玻片反面降温
(11) 快速放入二甲苯快速脱蜡(2道),梯度酒精洗,入水
(12) 苏木素滴加在载玻片上,加热1~2分钟(60℃左右,不能将苏木素烧开,以防切片脱落)
(13) 水洗
(14) 盐酸酒精分化1秒钟
(15) 水洗,温水蓝化
(17) 伊红2~5秒钟
(18) 梯度酒精快速脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》