技术文章

蛋白酶功能 :

涉及到许多细胞内和细胞外的过程:

1） 食物蛋白在消化道的消化

2） 激活无活性酶原和多肽激素/神经转移介质的释放

3） 调节血凝物质和纤维素

4） 内源性和外源性蛋白的细胞内消化

5） 跨膜的蛋白转移

6） 微生物对生物体攻击,通过释放蛋白酶的导致毒性增加

蛋白酶分类 :

根据催化中心结构的不同蛋白酶可分为4类 :

1. 丝氨酸蛋白酶在其活性中心含有丝氨酸和组氨酸，如: 弹性蛋白酶，血纤维蛋白溶酶，凝血酶，枯草杆菌蛋白酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶、凝血因子等。

2. 半胱氨酸蛋白酶（别名 :硫醇或SH 蛋白酶）在其催化中心含有半胱氨酸，如 : Calpain, 组织蛋白酶B、H和L。

3 天（门）冬氨酸蛋白酶 （羧基蛋白酶）在其活化中心含有天（门）冬氨酸， 如 : 组织蛋白酶D, 木瓜蛋白酶。

4. 金属蛋白酶含有金属离子， 即 : 锌2+在其催化中心，如氨基肽酶，羧基蛋白酶A 和 B，嗜热菌蛋白酶。

在分离蛋白时，组织或细胞裂解液中充满了来自溶酶体的酶,并且原来无活性的蛋白酶原被充分激活，开始消化其周围的蛋白质。为避免此因素，蛋白酶抑制剂必须被加入在缓冲液内以阻止蛋白酶对细胞组织的消化作用。来自哺乳类动物、植物、霉菌或细菌的组织，蛋白酶成分是不同的，并根据机体状态的发展蛋白酶也可以发生变化。哺乳类动物组织分离时比细菌或其它组织分离时更需要应用蛋白酶抑制剂使组织细胞受到*的保护。因此，在各种蛋白分离时，在各种蛋白电泳时蛋白酶抑制剂的适当选用就成了很重要的因素。

罗氏公司的Complete^TM 混合片，使您不用再花时间去寻找合适的抑制剂，只要加一片进缓冲液，您便可抑制多种不同的蛋白酶，有效地保护您的蛋白。这些溶解迅速的片剂方便可靠，免除了繁琐的称量、混合及DMSO溶解。

Roche蛋白保护产品——抑制剂混合片，您的全新选择 （ cOmplete 和 PhosSTOP）

cOmplete

抑制大多数组织或细胞类型提取液中的蛋白质水解活性, 包括动物、植物、酵母菌、细菌、真菌等。

在细胞溶解液缓冲液中加入一片速溶片即可使用，为您省去大量繁琐的操作。您不必再用分析天平称量多种微量，也不必再用二甲亚砜溶解。

一片速溶片可以保护10ml的细胞裂解液中的蛋白质，如果裂解液中蛋白质水解酶的含量很高，一片速溶片作用域7ml的细胞裂解液或者10ml裂解液中投放2片速溶片。

如果需要保存可以将速溶片制成储备液，制备方法：溶解1片速溶片指5ml重组水中保存。储存液存放于2~8℃可以保存一天；在-15~-20℃可以保存至少4周。

高浓度存储液可长期存放。在4°C条件下可储存1个月，-20°C条件下可储存至少6个月

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适用于甲醛固定。保持组织切片中蛋白质的磷酸化状态。PhosSTOP磷酸酶抑制剂与含甲醛（用于甲醛固定）的缓冲液具有良好的相容性。

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