一、仪器的工作原理
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理—一比耳定律。
τ=I/Io
log I/Io=KCL
A= KCL
从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。
二、752紫外可见分光光度计仪器的安装、使用、安装
1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查，电源电压是否正常，接地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。
2 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。
使用：仪器使用前需开机预热30min。
本仪器键盘共有4个键，分别为； 1 A /τ/C/F
1SD
2 ▽／0％
3∆／100％
4 A /τ/C/F键：每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。
A——吸光度（Absorbance）
T——透射比（Trans）
C——浓度（conc）
F——斜率（Factor）
（2）F值通过按键输入（后面介绍如何设置）
5SD键：该键具有2个功能
a）用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据，仪器发向计算机）。
b）当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前的F值，并自动转到C，计算当前的C值（C=F*A）。
6 ▽／0％键：该键具有2个功能
a）调零；只有在τ状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。
b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。
7 ∆／100％键；该键具有2个功能
a）只有在A、τ状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。
b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本键不放，自动加1会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动变为0，再往键开始自动加l。
例如：设置斜率为1500。
方法一
T）按 A／τ／C／F键切换到 F状态。
b）如果当前F值为1000，则按∆／100%键，直到F值为1500。
C）再按 SD键，表示当前的 F值为 1500，然后自动回到 C状态，假如所测的 A值为 0．234，则此时显示 C值为 0351。
方法二
a）按A／τ／C／F键切换到F状态。
b）如果当前的 F值为 1000，则按∆／100%键，直到F值为 1500、再按 A／τ／C／F键切换到C状态，假如所测的A值为0.224，则此时显示C值为0351。
722型分光光度计
一、 722型分光光度计测量原理
分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b（cm）成正比。其定律表达式A=abc
（a是比例系数）。当c的单位为mol/l时，比例系数用ε表示，则A=εbc称为摩尔吸光系数。其单位为L•mol-1•cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。
T（透光率）=I/I0 A（吸光度）= -lgT 或 A=K•C•L（比色皿的厚度）
测定时，入射光I,
吸光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，即“K”为常数。比色皿厚度一定，“L”、“I0”也一定。只要测出A即可算出“C”。
二、 722型分光光度计 的使用
1、将灵敏度旋钮调至“1”档（信号放大倍率小）。
2、开启电源，指示灯亮 ，选择开关置于“T”，波长调至到测试用波长。仪器预热20分钟。
3、打开试样室（光门自动关闭），调节透光率零点旋钮，使数字显示为000.0。（调节100%T旋钮），盖上试样室盖，将比色皿
架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透光率100%旋钮使数字显示100.0。如显示不到100.0，则可适当增加微电流放大的倍数。（增加灵敏度
的档数同时应重复（3）调节仪器透光率的“0”位）但尽量使倍率置于低档使用。这样仪器会有更高的稳定性。
4、预热后，按（3）连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置，待稳定后仪器可进行测定工作。
三、 722型分光光度计吸光度“A”的测量
将选择开关置于A 。调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为零，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
四、 浓度c的测量
将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值。
722型分光光度计 注意事项：
1、测量完毕，速将暗盒盖打开，关闭电源开关，将灵敏度旋钮调至低档，取出比色皿，将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内，关上盖子，将比色皿中的溶液倒入烧杯中，用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内。
2、每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换。
722型分光光度计 使用方法
（1）预热仪器 将选择开关置于“T”，打开电源开关，使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开，使光路切断。
（2）选定波长 根据实验要求，转动波长手轮，调至所需要的单色波长。
（3）固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下，尽可能采用灵敏度较低的挡，使用时，首先调到“1”挡，灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%”和“100%”。选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。
（4）调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”，（此时试样室是打开的）。
（5）调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的*格内，并对准光路，把试样室盖子轻轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。
（6）吸光度的测定 将选择开关置于“A”，盖上试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字显示为“.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开试样室盖，切断光路。
重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值。
（7）浓度的测定 选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。
（8）关机 实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架用软纸擦净。
