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植物体内游离脯氨酸含量实验原理

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2013/3/27 15:14:33

实验原理

 植物在正常条件下,游离脯氨酸含量很低,但遇到干旱、低温、盐碱等逆境时,游离脯氨酸便会大量积累,并且积累指数与植物的抗逆性有关。因此,脯氨酸可作为植物抗逆性的一项生化指标。

脯氨酸是水溶性zui大的氨基酸,具有很强的水合能力,其水溶液具有很高的水势。脯氨酸的 疏水端可和蛋白质结合,亲水端可与水分子结合,蛋白质可借助脯氨酸束缚更多的水,从而防止 渗透胁迫条件下蛋白质的脱水变性。 因此脯氨酸在植物的渗透调节中起重要作用, 而且即使在含 水量很低的细胞内,脯氨酸溶液仍能提供足够的自由水,以维持正常的生命活动。正常情况下, 植物体内脯氨酸含量并不高,但遭受水分、盐分等胁迫时体内的脯氨酸含量往往增加,它在一定 程度上反映植物受环境水分和盐度胁迫的情况,以及植物对水分和盐分胁迫的忍耐及抵抗能力。

采用磺基水杨酸提取植物体内的游离脯氨酸,不仅大大减小了其他氨基酸的干扰,快速简便,而且不受样品状态(干或鲜样)限制。在酸性条件下,脯氨酸与茚三酮反应稳定的红色缩合物,用甲苯萃取后,此缩合物在波长520nm处有一zui大吸收峰。脯氨酸浓度的高低在一定范围内与其消光度成正比。

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