北京索莱宝科技有限公司
2013/5/13 10:56:45DAB显色试剂盒(20×)说明书
货号:DA1010
规格: DA1010-3 DA1010-10
溶液 A: 3ml 10ml
溶液 B: 3ml 10ml
保存:
-20 ℃避光密闭保存,一年有效。避免反复冻融。短期可 2-8℃保存。
产品简介:
二氨基联苯胺(Diaminobenzidine,DAB )是过氧化物酶(POD )的底物,DAB显色液主要用于免疫过氧化
物酶法,适用于辣根过氧化物酶HRP 标记的免疫印记或免疫组化反应。过氧化物酶使底物发生反应,于反应部
位产生棕色沉淀物。免疫印记可直接在膜上显示条带。免疫组化标本显色时间一般为室温 5-20 分钟,随后在显
微镜下观察显色情况,显色充分后应将标本及时脱水封固。其终产物可直接在光镜下观察,也可经OsO4处理
后,增加反应产物的电子密度,用于电镜观察。
操作说明:
1. 对于组织切片或蛋白质印记膜,在与辣根过氧化物酶(HRP )标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适
当洗涤液洗涤3-5 次,每次 3-5 分钟。
2. 取900ul PBS(或双蒸水),加入50ul 溶液A,50ul 溶液B 混合均匀,即配成 DAB工作液。
如需要更大体积工作液,可按比例放大。此溶液必须现用现配,配好后避光保存,1 小时内使用,过期后请
将剩余的液体废弃。
3. 向组织切片或膜上加入适量 DAB工作液,确保能充分覆盖样品。
4. 室温避光孵育 3-10 分钟或更长时间,避免光照,直至显色至预期深浅。
5. 去除DAB染色工作液,用蒸馏水洗涤 2-3 次即可终止显色反应。
6. 对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,可对其进行其他染料复染。对于膜,显色反应终止后,可以
室温晾干避光保存。
注意事项:
1 .DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出,应确保结晶*溶解再行使用;
2 .显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;
3 .显色时间严格控制,根据情况调整,以免显色过度。固相膜显色数小时后即会褪色,不能*存在;
4 .DAB为可疑致癌物,请采取必要的防范措施。操作时应戴手套,尽量避免与皮肤接触,用后及时*冲洗,
接触DAB的实验用品好经洗液浸泡24h 后使用。
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