采用ELISA法，血清加到包被纯化的肺炎衣原体抗原的微滴孔中，使之发生反应，然后去除未结合的抗体，加入结合有HRP的抗人Ig抗体使之与已结合的抗体反应，结合的HRP与发色底物发生颜色反应。zui后，终止底物反应，在酶标仪上读出光密度值。
[标本准备]
取新鲜末梢血或静脉血。如采血后24h内不能进行试验，分离血清后将其保存于一20℃环境中。检测时，使样本恢复至室温。
[试剂]
1.预包被微孔板
2.阳性对照
3.弱阳性对照
4.阴性对照
5.标本稀释液
6.浓缩酶联物
7.底物A、B
8.终止液
[仪器]
酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。
[操作步骤]
1.本实验结果须结合临床表现、病史作出诊断后，方可采取适当临床处理。
2.试剂盒虽然含有消除干扰因子的物质，但仍可能有少量标本难以除尽干扰。因此，如某标本多项IgM均为阳性，应考虑RF的干扰。
3.将稀释标本置37℃环境中20min。
4.各加100ul阳性、弱阳性、阴性对照及已稀释待测标本上清液于相应孔中，空白对照孔加100u1标本稀释液，盖好反应板，置37℃环境中30min。
5.甩尽板中液体，每孔用200～300ul洗涤液洗5次，每次均需拍干。
6.每孔加酶联物100~1，盖好反应板，置37℃环境中30min。
7.甩尽板中液体，洗5次，每次拍干。
8.加底物A、B各1滴或各50tzl，混匀，置37℃环境中15min。
9.取出，加终止液1滴，用酶标仪450nm测其OD值。若肉眼观察则不加终止液，直接判断结果。
[注意事项]
1.配制洗涤液 l瓶浓缩洗涤液加475ml蒸馏水。配好的洗涤液短期内可置室温环境中，长期可存于2—8℃环境中。
2.配制酶联物 按1：101倍稀释，即取1u1浓缩酶联物加酶联物稀释液1 000ul（根据检测标本数量确定稀释量），未用完的丢弃。
3.待试剂盒平衡至室温后，待测标本按1;51稀释，即取4tA血清与200u1标本稀释液混合。
