siRNA转染前细胞培养-化工仪器网-手机版

siRNA转染前细胞培养

在细胞板上培养细胞时，应使细胞汇合在24小时内达到70-90%。

细胞培养用品	表面积（mm²/孔）	细胞密度	培养基（μL /孔）
96孔板	50	1.5´10⁴-5.0´10⁴	100μL
48孔板	100	3.0´10⁴-1.0´10⁵	200μL
24孔板	200	8.0´10⁴-2.0´10⁵	500μL
12孔板	401	1.6´10⁵-4.0´10⁵	1.0 mL
6孔板	962	3.0´10⁵-8.0´10⁵	2.0 mL
35 mm	962	3.0´10⁵-8.0´10⁵	2.0 mL
60 mm	2827	1.0´10⁶-2.5´10⁶	6.0 mL

合适的SiMi Transfection Reagents用量

合适的siRNA（DNA）：lipofetamin2000比例对核酸的转染有重要影响;我们推荐的DNA：lipofetamin2000为1：0.5—1：5（ug:ul），siRNA：SiMi Transfection Reagents为1：0.01-1：0.1（pmol：ul）一般情况下，此范围内都可获得高的转染效率。

细胞培养用品	siRNA/DNA	培养基zui终体积	SiMi Transfection Reagents（siRNA/DNA）
96孔板	5pmol/0.2μg	100μL	0.25μl/0.5μl
24孔板	20pmol/0.8μg	500μL	1μl /2μl
12孔板	40 pmol /1.6μg	1 mL	2μl /4μl
6孔板	100 pmol /4.0μg	2 mL	5μl /10μl
35 mm	100 pmol /4.0μg	2 mL	5μl /10μl
60 mm	600 pmol /8.0μg	5 mL	10μl /20μl