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2014/10/31 8:53:47引言
燕窝为雨燕科(Apodidae)金丝燕属(Collocalia)
的多种鸟类分泌出的唾液与其绒羽混合凝结于悬崖峭壁上
而筑成的巢窝。燕窝是一种名贵的滋补佳品和宴席佳
肴,富含人体必须的氨基酸、多糖类及蛋白质,药食皆
宜,深受国内外消费者的喜爱。现代研究发现,燕窝具有
多种药理功效,主要有抗病毒、提高免疫力和强健骨骼、
紧致皮肤等功效。
由于燕窝资源、营养丰富、价格昂贵,且缺少国
家标准或行业标准对燕窝伪劣真假进行鉴别,市场上存在
大量品质低劣及假冒燕窝产品。针对燕窝及燕窝饮品的质
量及等级问题,有学者通过紫外分光光度法、液相色
谱法对燕窝中的唾液酸成分进行分析,但可通过加入工业
唾液酸等方法进行掺假;也有学者用气相色谱法测定燕窝
中4-5种醛糖的含量,根据其*的峰比例,构成易于识
别的燕窝“指纹”图进行燕窝样品的鉴定及分析。也有通
过氨基酸分析法测定燕窝中各种氨基酸的构成比例来分析
燕窝真假。
本文通过阴离子色谱-脉冲安培检测法测定燕窝
水解液中糖的组成,分析糖组成中各种糖及唾液酸的相
对比例来鉴别燕窝真假,方法无需衍生、简单可行,结
果可靠。
测试条件
仪器:ICS-5000离子色谱仪(ThermoFisher公司);
分析柱:CarbonPac PA1, 250×4 mm,分析柱
(P/N:035391);
CarbonPac, PA1, 50×4 mm, (P/N:043096);
柱温:30 ℃;
淋洗液:中性及氨基糖
唾液酸 : 0-26 min, 100 mmol/L 氢氧化钠 +50 mmol/L
醋酸钠
流速:1.0 mL/min;
定量环:10 µL;
检测方式:电化学检测,金电极,标准糖电位。
AS-DV自动进样器
样品前处理
中性及氨基糖:称取50 mg的燕窝粉末样品加入到特
富龙的螺纹管中,加入2 mL4N三氟*乙* |。密封好特富龙
管,在115 ℃下水解3 h。水解完成后冷却到室温,将水
解管中的的混合物在减压条件下旋干,将残留物用高纯
水定容至1000 mL。
唾液酸:称取50 mg的燕窝粉末样品加入到特富龙的
螺纹管中,加入2 mL0.1N三氟*乙* |。密封好特富龙管,
在80 ℃下水解1 h。水解完成后冷却到室温,将水解管中
的的混合物在减压条件下旋干,将残留物用高纯水定容
至1000 mL。
结果和讨论
色谱条件优化
糖类化合物具有弱酸性及亲水性,在比较强的碱性
溶液中以阴离子形态存在。在强碱性条件下,糖结构中
的羟基等点化学活性基团在适当的电位下可以在金电极
表面被氧化从而导致电流变化,可通过脉冲安培检测器
进行检测。使用CarbonPac PA1柱能在合适的淋洗液条
件下将几种糖依次洗脱。实验发现当氢氧化钠浓度低于
14 mmol/L 时,葡萄糖胺与半乳糖分离度变差;当氢氧化
钠浓度高于20 mmol/L 时葡萄糖与甘露糖分离度变差;
综合考虑,选择16 mmol/L氢氧化钠作为淋洗液,七种糖
所得分离情况如色谱图1所示。唾液酸的保留较强,采用
CarbonPac PA1分离唾液酸需要添加一定量的醋酸钠增加
洗脱能力,优化后,所得结果如色谱图2所示。
线性、相关系数、检测限及精密度
将不同浓度的糖及唾液酸标准储备溶液稀释配制得
到一浓度系列,对上述系列浓度依次测定, 取其峰面积
值,以峰面积为纵坐标,标准液质量浓度为横坐标建立
标准工作曲线,得到糖及唾液酸的线性回归方程和相关
系数。取标准溶液连续进样5针,得到精密度。结果如下
表1所示。
实际样品分析
取市场上购得的燕窝样品,照选定的样品前处理方
法进行处理,按选定的色谱条件进行测定,外标法定
量,测定结果如表2及分离谱图3、4: