人胎盘cDNA说明书

人胎盘cDNA说明书

Human Placenta cDNA

人胎盘  cDNA

Cat. No.   YJ0568

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组分说明

                Cat. No.                 YJ0568

                Volume             100  μl (20 reaction)

  产品简介

       本产品是以人胎盘组织 RNA 为模板，oligodt 以及 Random 为引物,  用上海研谨生物的高灵敏度的逆转录酶(YJ0740)

   反转录得到的 PCR 即用型 cDNA，可用于 PCR  实验的阳性对照。

  纯度

      OD260/280≈1.8

  操作步骤

       以下举例为常规 PCR  反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小丌同进行相应的改进

  和优化。

  1.  PCR反应体系：

   试剂                     50  μl体系                             终浓度

10×Taq PCR Buffer with Mg 2+      5  μl                              1×

dNTP Mix，2.5 mM each             4  μl                    200  μM each

  Forward Primer，10  μM           2μl                     0.4  μM

  Reverse Primer，10  μM             2  μl                  0.4  μM

  Human Placenta cDNA                 5  μl

  Taq DNA Polymerase，2.5 U/μl           0.5  μl

   RNase-Free Water                     up to 50  μl

      注意：1）引物浓度请以终浓度0.1-1.0  μM作为设定范围的参考。扩增效率丌高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降 低引物浓度，由此优化反应体系。

           2）镁离子浓度请以终浓度1.5-3 mM作为设定范围的参考。本产品的10×PCR Buffer中已经含有15 mM镁离子，可根据丌同的引物对和模板来调节镁离子浓度，由此优化反应体系。

  2.  将混合好的液体进行PCR反应。

  3.  结果检测：反应结束后取5 μl反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。