SuperQuickRT cDNA*链合成试剂盒说明书
SuperQuickRT cDNA Kit
（For Real-time PCR）
SuperQuickRT cDNA*链合成试剂盒
（For Real-time PCR）
目录号：YJ2381
保存条件：-20℃。
规格说明
Cat. No. YJ2381B YJ2381
Kit Size 25 100
SuperQuickRT Mix 12.5 μl 50 μl
5×RT Buffer（For Real-time PCR） 55 μl 220 μl
Primer Mix 27.5 μl 110 μl
dNTP Mix (2.5 mM Each) 55 μl 220 μl
RNase-Free Water 1 ml 1 ml
本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途
产品简介
本产品是为Real-time RT-PCR研发的快速逆转录试剂，其包含从RNA模板逆转录
成cDNA*链所需的全部试剂，优化的反应体系为快速逆转录酶提供更可靠的反应条
件。SuperQuickRT逆转酶逆转录效率高，可对少量RNA模板进行良好的逆转录反应，
15分钟即可完成荧光定量 PCR模板cDNA*链合成。另外，逆转录反应温度可以提
高到50 oC，可通读GC含量高和二级结构复杂的RNA模板。
产品特点
1．快速：42 oC，15min可完成cDNA*链合成。
2．反转录效率高：反转录效率高于90%。
3．灵敏度高：pg级模板也可以得到高质量的cDNA。
4．通读复杂模板：GC含量高和二级结构复杂模板。
注意事项
1．在操作过程中应避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染，建议操作人
员带口罩和一次性手套并经常更换手套，使用专门的仪器和耗材。
2．逆转录体系配制在冰上进行操作，防止RNA发生降解。试剂盒的酶使用后尽快置于
-20 oC保存，并尽量避免反复冻融。
3．Primer Mix是由Oligo(dT)和random primer配制而成，也可根据实验需要选用Oligo-dT
Primer或Gene Specific Primer。
4．反应体系可倍比放大，10 μl反应体系可zui大使用1μg总RNA。
5．对于二级结构复杂的RNA模板，建议在操作步骤之前，将模板RNA在65℃孵育5min立刻置于冰上，短暂离心后进行下一步操作。
操作步骤
1．将模板RNA在冰上解冻；将试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上，使用前将每种
溶液涡旋振荡混匀，并经短暂离心后使用。
2．根据以下表格配制反应体系，涡旋震荡混匀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
试剂 10 μl反应体系 终浓度
dNTP Mix (2.5 mM Each) 2 μl 500 μM Each
Primer Mix 1 μl
1）
RNA Template X μl 10 pg～1 μg2）
5×RT Buffer（for Real-time PCR） 2 μl 1×
SuperQuickRT Mix 0.5 μl
RNase-Free Water up to 10 μl
注意：1）根据实验需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer，建议10 μl 反应体系加入Oligo-dT Primer 25 pmol，或Gene Specific Primer 2.5 pmol 。
2）如果总RNA量大于1 μg，请按比例扩大反应体系。
3．42℃孵育15分钟。
注意：对于二级结构复杂或GC含量高的模板，可以提高逆转录温度至50℃，增强逆转录效率。
4．85℃孵育5分钟，使逆转录酶失活。
5．短暂离心后置于冰上，再进行后续Real-time PCR检测，如果需要长时间保存，请
置于-20℃。
注意：进行Real-time PCR反应时，逆转录产物的加量应不超过PCR反应总体积的1/10。
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特异性强、灵敏度低、扩增效率高
