细胞活力检测

                                 细胞活力检测

    在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力。由组织中分离细胞一般要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用；复苏后的细胞也要检查活力，了解冻存和复苏的效果。细胞悬液制备后，zui常用活体染料台盼蓝对细胞染色，进行细胞计数。

    正常细胞胞膜完整，台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞胞膜通透性增加，台盼蓝能进入细胞内而使细胞着色（蓝色）。

操作步骤：

1. 配制4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100mL，用滤纸过滤，4℃保存。使用时用PBS稀释至0.4%。

2. 胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释（106 cells/mL）。

3. 取少量细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合，轻轻吹打混匀，染色2~3min。

4. 显微镜下观察，死细胞着浅蓝色并膨大，无光泽；活细胞保持正常形态，无色透明有光泽。若需计算活细胞率则将染色的细胞悬液滴入细胞计数板计数。

活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%

注意事项：台盼蓝染细胞时，时间不宜过长。否则，部分活细胞也会着色，会干扰计数的准确性。