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做全血DNA提取实验时应该怎样选择抗凝剂

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2015/10/29 9:04:36

在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

1.从全血中制备基因组DNA,ACD做为抗凝剂要优于EDTA,因为他更加能保存高分子质量的DNA,然而,血样常常被收集于用定量EDTA作为抗凝剂的小管中。
2.在大多数美国的医院中,收集血样的小管均用颜色标明是否含有抗凝剂,紫色顶管盖的小管一般含有抗凝剂,通常是EDTA的干粉。黄色顶盖的小管不含抗凝剂。
3.在分子克隆实验中,前者一般用于收集血样用于制备基因组的DNA,后者用于收集血样作为用EB病毒的永生化淋巴细胞的来源。这些永生化的细胞可以作为可更新的来源来制备大量的DNA以备后用,如进行遗传学的研究等等!

注意事项:血液可以在0度条件下保存一周左右,或者是零下70度条件下无限期保存!做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素!因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂!

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