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2016/1/26 15:47:47Hank's液是生物医学试验中常见的平衡盐溶液(BSS)之一,简称HBSS。主要用于配制培养液,稀释剂和细胞清洗液,而不能单独作为细胞,组织培养液。D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。
Hanks液的配制
原液A |
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| NaCl | 160g | |
| MgSO4·7H2O | 2g | |
| KCl | 8g | |
| Mg Cl2·6H2O | 2g | |
| CaCl2 | 2.8g | |
| 溶于1000ml双蒸水 |
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原液 B |
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(1) | Na2HPO4·12H2O | 3.04g | |
| KH2PO4 | 1.2g | |
| 葡萄糖 | 20.0g | |
| 溶于800ml双蒸水 |
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(2) | 0.4%酚红溶液:取酚红0.4g,置玻璃研钵中,逐滴加入0.1N NaOH,并研磨,直*溶解,约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中,用双蒸水洗下研钵中残留酚红液,并入量瓶中,后补加双蒸水100ml。 | ||
| 将(1)液和(2)液混合,补加双蒸水1000ml,即为原液B。 | ||
应用液 |
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| 原液A | 1份 | |
| 原液B | 1份 | |
| 双蒸水 | 18份 | |
| 混合后,分装于200ml小瓶中,10磅高压蒸气灭菌15分钟,临用前用无菌的5.6% NaHCO3调pH7.2~7.6 |
注意事项:
1.BSS的pH值应确定为7.2-7.4之间。
2.如配制的Hanks液高压灭菌后液体变混浊,则可将100 mL的CaCl2与含有其他成分的液体分别装瓶高压灭菌之后,再在无菌条件下配制,定容。这样可以避免高压灭菌后液体变混。
3.胰酶受热易失活,所以尽量避免盛夏配制,并且在配制过程中温度应始终保持在4℃左右。
4.胰酶研磨要充分,否则在过滤时会将较大的颗粒过滤掉,不能达到真正的浓度。
5.胰酶分装时尽量分装成多瓶,并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时体积会膨胀,而多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并可能造成污染。
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