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木瓜蛋白酶的提取方法

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2016/4/16 8:44:43

木瓜蛋白酶(Papain)简称木瓜酶,又称为木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Carica papaya)果实中的乳汁,采用现代生物工程技术提炼而成的生物酶制品。木瓜蛋白酶主要作用:食品加工、医药使用、日化洗涤、饲料加工、皮革 和纺织等行业;以未成熟的番木瓜乳液为原料,经过生物提取、微滤、冷冻、干燥提炼而成的酶制剂。
木瓜蛋白酶的提取方法:(仅供参考)
由木瓜的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。木瓜蛋白酶韵生产方法有三种,分别是直接热风烘干法、喷雾干燥法及膜分离冻干法。
直接烘干
生产方法较简单、快速,但生产出来的成品只是粗酶,杂质多、色泽差且微生物超标,酶活力也较低,只有60万~80万单位/g。多为个体工厂采用,已不能满足国内食品质量卫生安全等。
喷雾干燥
此法是先通过离心去除部分杂质后再进行喷雾干燥,所生产出的成品酶活力相对高,达到100万单位/g左右,杂质相对也较少,色泽相对也较白。但产品喷雾时容易粘壁,酶活损失较大,水溶性相对也较差,而且酶活稳定性也较差。
膜分离法
该生产方法不但避免了以上两种方法的缺点,且生产过程卫生安全,收率也高,所生产的成品酶活损失小,酶活力一般可达到280万~350万单位/g,高可达400万单位/g,且酶活稳定性好,纯度高,色泽洁白,细菌数低,严格操作可达到医药。
其提取工艺条件为超声波功率300W,超声处理时间200s,果浆质量分数30%;经超声波强化提取,酶活力提高到原先的1.71倍;该酶在40℃以下,pH为5.4~6.0时酶活力相对稳定;EDTA、Cys和维生素C对酶活力具有激活作用,CuS04和ZnCl2具有抑制作用,而KCl、NaCI、CaCl2、MgS04对酶活力的影响不大。
木瓜蛋白酶的分离纯化工艺:采用初步采集处理,20%、40%硫酸铵分级沉淀、SP-sephadexC50柱色谱、羟基磷灰石柱色谱,从番木瓜乳汁中分离纯化木瓜蛋白酶。可获得比活为1184U/mg的纯酶,活力回收率为55.79%,纯度达到99.31%,为高纯度的木瓜蛋白酶。
北京索莱宝科技有限公司是一家集产品研发、生产、销售、服务于一体的高科技生物企业。产品主要涵盖生化试剂、分子生物学试剂、细胞培养、免疫学产品及实验耗材等。木瓜蛋白酶为索莱宝自产产品,其货号为G8430。木瓜蛋白酶为乳白色微黄色粉末,具有木瓜*的气味,稍具有吸湿性。水解蛋白质能力强,但几乎不能分解蛋白胨,易溶于水,甘油,不溶于一般的有机溶剂,耐热性强。

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