HBE 人支气管上皮细胞，进口胎牛血清

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细胞培养技术属于细胞工程范畴，细胞工程包括细胞融合技术、单克隆抗体的制备、核移植技术（克隆）等,而这些技术中都有细胞培养过程,所以说细胞培养是生物学研究的zui基本技术之一。

上海慧颖生物供应HBE 人支气管上皮细胞，进口胎牛血清，活性好、存活率高。随着细胞生物学尤其是干细胞研究的快速发展，在细胞治疗领域已经进行了大量的探索，取得了一系列的令人振奋的成果，且部分基础研究成果已经在心血管系统疾病 、神经系统疾病、肌肉骨骼相关疾病、糖尿病等。

养细胞经验分享：

1.细胞形态观察。细胞膜是每天必须观察的，看是否清晰，细胞的死亡往往是从细胞膜的破裂开始的，早期的表现就是细胞膜某一点出现欠完整或者毛发影。

2.细胞往往会有“抱团”现象，抱团生长或死亡，个人认为应该勤换液或传代，尽量避 免细胞抱团。

3.细胞生长迅速，强烈建议用较大的培养瓶养，用小瓶养的话，换液不及时，很容易死 亡。细胞的生长速度一般为2天左右就需要传代，并且一般为一传三，或一传四。

4.培养液：1640|DMEM|MEM|IMDM|a-MEM培养液，1L一般加碳酸氢钠2g，并加双抗，胎牛血清浓度*为12%，zui低不低于10%，有些细胞对胎牛血清高度依赖，比如WRO细胞，HT-22细胞，HA-VSMC细胞，NK-92细胞等。培养液PH应调为7.20-7.40之间。

5.防污染。L-02细胞生长迅速，较少发生污染，但常规措施应该做好。比如无菌操作，酒精 消毒等，培养瓶口建议过火，包括瓶盖，应过火4秒左右。

6.冻存。-20一小时，-80次夜，液氮长期保存。强烈建议液氮长期保存，尽量不要在-80长期 保存，死亡率很高。

7.复苏。调节水浴箱温度为42℃，并提前在试管内放置10倍培养液，使培养液温度与室温一 致。1分钟内融化细胞(禁止摇晃冻存管)，移取至试管内，动作要轻，从试管管底开始慢慢上提 移液管，使细胞在培养液内分布均匀，离心，洗2次。

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其它经验概括：

细胞类型 编辑 细胞类型根据是否附于支持物上生长的特性，分为 贴附型、悬浮型。 贴附型 细胞贴附在支持物表面生长，只依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞(Anchorrage-dependent cells)这种现象与细胞分化有关。 贴附型细胞的分型 1.成纤维型细胞：(fibroblast) 来自中胚层 特点：与体内成纤维细胞形态相似,胞体梭型或不规则三角形,中央有圆形核,胞质向外伸出2～3个长短不同的突起。细胞在生长时呈放射状,漩涡或火焰状走行。 起源：细胞来自中胚层间充质组织。 除真正的成纤维细胞、心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮细胞。 注意：细胞在培养时成为成纤维型细胞是一种惯称,与体内细胞不同。 2.上皮型细胞(epithlium cell type) 来自外胚层。 特点：扁平不规则多角型、圆形核、细胞紧密相连成细胞增殖数目增多时,整个上皮膜随之移动。边缘细胞很少脱离细胞群而单独活动“ 拉网”现象与起源内外胚层组织有关。 组织: 皮肤表皮及其衍生物(汗腺、皮脂腺)消化道分上皮、肝、胰、肺泡上皮。 3. 游走型细胞(wandering cell type) 特点：在支持物上散在生长,不连接成片,胞质伸出伪足或突起呈活跃的游走或变形运动,速度快不规则, 密度大连接成片呈多角形不易与其他类型的细胞 区别。 4. 多形型细胞(polymorphic cell type) 特点： 无规律的形态，如神经细胞。 悬浮型 特点： 不贴附在支持物生长，胞体圆形，在培养液中生长空间大，可长时间的生长，繁殖旺盛便于做细胞代谢研究。S180肉瘤、血液里的白细胞、K562、 HL－60。 分型的目的： 方便描述细胞在培养过程中的形态变化。培养条件好时，细胞相对稳定，可反映出起源、正常异常的区别，作为判定细胞生物学性状指标。 强调：一般形态并不是一项可靠指标要受各方面影响。 如：反复开关温箱、温度、C02的浓度、培养基变碱、支原体、pH值。细胞在接种时呈三角型状态，经培养一定时间后，细胞在传代前已形成上皮型细胞。

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