多环芳烃（polcyclicaromatichydrocarbons，PAHs）是环境中分布极为广泛的有机污染物，存在于空气、水、土壤、沉积物、食品、生物体等各种环境介质中，具有生物难降解特性，是一类持久性有机污染物[1]。PAHs具有明显的致癌、致畸和致突变作用，与多种癌症的发生有关，是一类威胁人类健康的主要环境污染物[2]。已有研究表明，食品和水是人类受多环芳烃污染的主要途径[3]，食品中产生多环芳烃的途径包括环境污染、加工过程和包装等。对食用植物油而言，多环芳烃可在油籽干燥过程中与燃烧不*或热解燃气直接接触而产生，也有可能在收获、运输、加工等过程中因接触机油等而受到多环芳烃污染，在某些地区，农民将大豆等食用油原料晾晒在沥青路面上，这也有可能残留多环芳烃[4]。Pandey等在2004年对296个食用植物油样品多环芳烃的检测中发现，88.5%的样品存在多环芳烃污染[5]。
针对食用植物油中有可能普遍存在的多环芳烃污染，世界各国均制定了严格的*。我国在GB2762—2012中规定苯并（a）芘（多环芳烃的代表性物质）的高残留*为10μg/kg[6]；欧盟委员会法令（EC）NO835—2011规定可食用油、脂肪（不包括可可油和椰子油）中苯并（a）芘的高残留*为2μg/kg，且苯并（a）芘、蒽、荧蒽、屈4种多环芳烃总*值≤10μg/kg；韩国规定植物油中苯并（a）芘的高残留*为2μg/kg；西班牙规定重PAH（5～6环）总量的*为5μg/kg，其中，每种的*为2μg/kg[7]。上对食用油中多环芳烃的检测方法也提出了很高的要求。我国《食品中苯并（a）芘的测定》（GB/T5009.27—2003）采用荧光分光光度计法和目测比色法[8]，但只能监控食品中的一种多环芳烃，且效果较差；《动植物油脂多环芳烃的测定》（GB/T24893—2010）采用固相萃取法[9]，但整个过程耗时较长。张志伟等报道利用供体受体复合色谱法测定植物油中16种欧盟优控多环芳烃[4，10]，但该方法需要用到DAAC净化，不易推广。本试验针对植物油中16种美国环保局（EPA）优控多环芳烃，进行凝胶渗透色谱（GPC）净化和气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）测定方法研究，以期为食用植物油中多环芳烃的检测提供有益参考。
1材料与方法
1.1材料
食用植物油样品购自南京苏果市。
1.2试剂
环己烷、正己烷、乙酸乙酯均为色谱纯，购自美国TEDIA公司；萘、苊、二氢苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、屈、苯并（a）蒽、苯并（k）荧蒽、苯并（b）荧蒽、苯并（a）芘、二苯并（a，h）蒽、茚并（1，2，3-cd）芘、苯并（g，h，i）芘，共16种多环芳烃混合标准品，美国Accustandard公司生产，每种物质均为100μg/mL甲醇溶液，于-4℃条件下避光保存。
1.3仪器设备
XS205Dualrnge电子分析天平，瑞士MettlerToledo生产；FreeStyleTM凝胶渗透色谱仪（含GPC、EVA模块）和300mm×25mm凝胶渗透色谱柱（填料为BioBeadsS-X350g），德国LCTech生产；7890A-5975C气质联用仪、30m×250μm×0.25μm气相色谱柱HP-5MSUI，美国Agilenttechnologies生产。
1.4测定方法
1.4.1植物油的制备参考张志伟方法[4]，称取大豆油约40g于圆底烧瓶中，加入2g活性炭，旋转蒸发仪中90℃加热2h，取出3000r/min离心5min，上清液过0.45μm滤膜除去杂质，经检测无多环芳烃峰后备用。
1.4.2样品提取与净化称取1.00g植物油样品，加入10mL比例为1∶1的乙酸乙酯和环己烷，涡旋均质，待GPC净化。GPC流动相为1∶1的乙酸乙酯和环己烷，流动相流速5mL/min，上样量为5mL。弃去初24min的收集液，收集24～32min的流出液在线浓缩至近干，正己烷定容至1mL，待进气质联用仪分析。
1.4.3色谱、质谱条件色谱条件：载气为纯度>99.9999%的He，流速为1min/L，进样口温度为280℃，进样量为1μL，脉冲不分流模式进样，30m×0.25mm×0.25μmHP-5MS色谱柱。程序升温模式：40℃1min；以10℃/min升至200℃，维持2min；以10℃/min升至300℃。
质谱条件：传输线温度为300℃、EI源温度为230℃、四级杆温度为150℃、电离能量70eV、溶剂延迟为6min。全扫描（SCAN，m/z100-450）模式用于试验条件优化，选择离子检测（SIM）模式用于定性、定量分析。
2结果与分析
2.1进样条件优化
分别选择脉冲不分流模式和不分流模式进样，比较进样口温度为260、280、300℃时100ng/mL16种多环芳烃标样的总响应值。由图1可见，脉冲不分流模式下多环芳烃的总响应值是不分流模式的2倍；进样口温度为280℃时，16种多环芳烃标样的总响应值高。2.2SIM模式参数设置
通过SCAN模式获得总离子流图，根据保留时间和碎片离子将化合物分为8组（表1）。由于多环芳烃类化合物结构比较稳定，其特征离子多数为分子离子及其同位素离子。
2.3GPC净化条件的建立与优化
采用分段收集建立GPC净化方法：将标样注入GPC，流动相以5mL/min流速冲洗，弃去初10min的冲洗液，10～50min之间每2min收集1次，约10mL，摇匀后进气质联用仪分析，计算各多环芳烃累计回收率。以萘为例，由图2可见，在第24～26min，萘开始从GPC分离柱中流出，至30min达到95.1%，后基本无流出。因此，综合考虑16种多环芳烃的流出曲线，确定本试验GPC的收集条件为：自24min开始收集流出液，直至30min，此时，脂肪等大分子物质和16种多环芳烃可以得到很好的分离。
2.4气质联用法参数测定
以各多环芳烃物质标准溶液浓度与对应的响应面面积绘制标准曲线，确定线性范围，计算线性方程及线性相关系数；以3倍信号噪音比计算测定方法的检出限（LOD），以10倍信号噪音比计算测定方法的定量限（LOQ）；对多环芳烃植物油添加1μg/mL多环芳烃混标液1mL，即加标量为1μg，进行6次独立测定，求得平均加标回收率（R）及相对标准偏差（RSD）。由表2可见，16种多环芳烃在0.5～50μg/kg范围内线性关系良好，r2值均在0.9970以上；16种多环芳烃的检出限范围0.07～0.2μg/kg，定量限达到0.2～0.5μg/kg；平均加标回收率为80%～101%，相对标准偏差范围为1.2%～9.9%。气质联用法测定的参数均满足GB/T27404要求，可以用于食用植物油中多环芳烃的检测。
食品基质中多环芳烃的净化，目前流行的是固相萃取。对植物油而言，在提取过程中由于多环芳烃含量多数为痕量级，且具有脂溶性特征，因此，基质中的脂肪通常会与多环芳烃共同被提取出来，成为主要的检测干扰物质。凝胶渗透色谱通过脂肪分子和多环芳烃分子量的差异而分离，本试验净化方法可以有效去除脂肪分子，同时可保留90%以上的待测物质多环芳烃。
对于多环芳烃的检测，常见的是液相色谱荧光法（HPLC-FLD）和气质联用法（GC-MS）。HPLC-FLD的好处在于方法简便，不需要高值仪器，对能发射荧光的多环芳烃有较好的选择性和灵敏度。和HPLC-FLD相比，GC-MS法优势在于GC可以提供比HPLC更高的分离能力，MS可以提供更好的选择性，同时还可以给出待测物质的结构信息。对于不能激发或只能激发较弱荧光的多环芳烃如萘、苊、二氢苊、芴等，检测只能依赖于GC-MS方法。
