瑞氏染色的注意事项

 瑞氏染色的注意事项

    瑞氏染色法是血细胞分析经典和常用的染色法。 是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用，各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。因此，染色后同一血片上各种细胞可以染上各自特征性的颜色。 在瑞氏染色的过程中也有一些注意事项。

    瑞氏染色的注意事项

    1.血涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。

    2.冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久，以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。

    3.染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。

    4.瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇（AR级以上）和甘油组成，Ⅱ液为磷酸盐缓冲液（pH6.4～pH6.8）。

    5.由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸性环境中下正电荷增多，易与伊红结合，染色偏红；在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。

    6. PH对细胞染色有影响。由于细胞中各种蛋白均为两性电解质，所带电荷随溶液PH而定。对某一蛋白质而言，如环境PH使用清洁中性的玻璃片，稀释液必须用PH6.4～6.8的确良缓冲液。冲洗玻片必须用流水。

    7.未干透的血膜不能染色，否则染色时血膜易脱落。

    8.染色时间与染液浓度、染色温度成反比；而与细胞数量成正比。

    9.如血膜上有染料颗粒沉积，可加少许甲醇溶解，但需立即用水冲洗掉甲醇，以免脱色。

    10. 染色过淡，可以复染。复染时应先加缓冲液，创造良好的染色环境，而后加染液，或加染液与缓冲液的混合液，不可先加染液。

    11.染色过深可用水冲洗或浸泡水中一定时间，也可用甲醇脱色。

    12.染色偏酸或偏碱时，均应更换缓冲液再重染。

    以上为瑞士染色的注意事项，由于瑞士染液系中性染料，又有缓冲液调节酸碱度，所以细胞受染后，蓝红等颜色都较适中，核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚。