hESC细胞培养教程

一.传代条件

细胞满足以下条件之一，即需要进行细胞传代：

1. 细胞汇合度达85%左右，移动视野观察细胞生长状态，整个皿密度均匀，没有过大的克隆或者克隆过于致密的部分，一般皿中心部分比边缘密度略大;一般情况下每4天传代一次，即使克隆团较小，汇合度不足，也建议不要连续培养超过5天；

2. 细胞汇合度较低，但干细胞集落过大，中央细胞生长不良；

二.传代间隔和比例

1. 可根据细胞生长状态和实验需求按1:5~1:20的比列进行传代；

2. 如果细胞正常，克隆汇合度85%, 大小均匀，建议按照1:10进行传代；

3. 如果密度偏低，则可降低传代比例，密度偏高，则增加传代比例。