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Sepharose CL- 4B 琼脂糖凝胶CL-4B
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生产厂家北京索莱宝科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京,并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,拥有专业的研发和质量检测团队以及*的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到全国科研工作者的认可,成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员,我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广,品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时,索莱宝公司提供各种常规生化试剂,库存常备产品多达10000多种,可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面,索莱宝谨记公司信念:质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程,科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序,我们恪守对每一位用户的承诺:用专业的态度做专业的品牌。同时,公司组建了一支专业的技术服务队伍,能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
索莱宝公司坚持与接轨,注重和*企业的合作与交流,并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作,不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念:“为科研服务,为生命尽责”。一个人能够走多远,取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。
索莱宝诚招生物试剂研发人员,期待与广大同行精诚合作,为广大科研工作者提供优质的产品,高效的物流以及专业的售后服务。索莱宝感谢所有朋友的支持与帮助,您的支持是我们前进的动力和保障。让我们携手同行,共同创造美好的明天。
2016年索莱宝获得*认证。
Sepharose CL- 4B 琼脂糖凝胶CL-4B
品 牌:solarbio
中文名称:琼脂糖凝胶CL-4B
英文名称:Sepharose CL-4B
货 号:S8741
供应商:北京索莱宝科技有限公司
北京索莱宝做为专业的生化试剂生产商与供应商,欢迎您咨询订购!
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: :蔡会芳
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Sepharose CL- 4B 琼脂糖凝胶CL-4B
交联琼脂糖凝胶 CL-4B说明书
交联琼脂糖凝胶 CL-4B是在4B琼脂糖微球的基础上通过交联使微球的刚性增强,理化性能提高,有利用于工业生产。该介质用于生物大分子的凝胶层析。
1 外观
本品为白色球状凝胶,无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
2 理化指标
项 目 | 指 标 |
基 质 | 4% 交联琼脂糖 |
排阻极限 | 60000~20×106 (球蛋白) |
形状 | 球形 |
粒径 | 45~165μm |
高流速 | 30 cm/h* |
耐压 | 0.025 MPa |
pH适用 | 3~13 (长时间) ,2~14(短时间,在位清洗) |
化学稳定性 | 可耐8mol/L尿素、6mol/L盐酸胍;可耐有机溶剂,如乙醇、DMF、THF、DMS、CH3Cl、丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡啶、乙腈 |
*检测条件: 层析柱10mm×300mm *柱床高15cm,25℃,流动相为0.1mol/LNaCl。
3 包装
Sepharose CL- 4B 琼脂糖凝胶CL-4B
以聚胺酯瓶密封包装,外贴标签。
4 贮存
Sepharose CL- 4B 琼脂糖凝胶CL-4B
应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20% 乙醇),通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃(20% 乙醇)。
5 注意事项
Sepharose CL- 4B 琼脂糖凝胶CL-4B
应避免与氧化剂接触,避免长时间暴露在空气中。
6 运输
运输中应避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
7 保质期
5年。
8 应用
Sepharose CL- 4B 琼脂糖凝胶CL-4B
具有很高的化学稳定性、高流速、较好的机械性能、可多次重复使用等特点,非特异性吸附低,回收率高,可用有机溶剂及1~2mol/L 的NaOH在位清洗,适用于工业规模生产,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的凝胶色谱纯化。
下面简要介绍介质的使用过程。
8.1 装柱
凝胶过滤介质的使用对装柱的要求较高,为了保证分离效果,一般通过柱子上加一个装柱器来使分离柱装满凝胶,或采用带有轴向加压装置的柱子。凝胶柱床一般高于60cm。装柱效果可用染料或丙酮-水溶液进行检验。
以下过程为通用介质装填过程。若为带有轴向加压装置的柱子,可在柱床稳定后将柱床压紧,接好管路。
(1)让所有的材料和试剂达到室温。配制缓冲液。凝胶层析上样、平衡和洗脱只用一种低盐浓度的缓冲液。
(2)选择一根一定直径的柱子,长约30~60cm,根据柱子大小取所需量的凝胶(约为柱床体积的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1的比例)配成匀浆。
(3)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。
(4)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
(5)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过,使柱床稳定。用缓冲液平衡柱子,到柱床稳定。
(6)好用一个装柱器辅助装柱。装完后柱床上端轻轻刮平,上好柱头。
8.2 平衡
让缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。
8.3 上样
(1)样品用缓冲液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理,再上样。
(2)质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的,分子量大的先流出来。
(3)样体积约为柱体积的1~2%,越小分离越好。
8.4 洗脱
用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。
8.5 再生
一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。
8.6 注意
在装柱、使用和保存柱子的时候,始终要避免柱子流干气泡进入。
若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
8.7 在位清洗
(1)对于以离子键结合上去的蛋白,可以用2M Nacl去除。
(2)对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类,可用1M NaOH 去除。
(3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。
清洗完毕后,用至少3倍缓冲液平衡柱子。
8.8 注意
在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干气泡进入。
8.9 去热源
用0.5M的氢氧化钠清洗柱子5~6小时或用0.1M的氢氧化钠24小时。或用以下方法步骤去除:
(1)2倍柱体积的70%乙醇;
(2)2倍柱体积50mM Tris-Hcl pH7.5;
(3)1倍柱体积4M尿素;
(4)3倍柱体积的Tris缓冲液+0.1M Nacl;
以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。
8.10 消毒
用0.5~1M NaOH室温下洗8~10倍柱体积,初始缓冲液平衡柱子。