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Anti-MKP-1/DUSP1/FITC【FITC.PE.APC各类标记】

型号
荧光标记抗体 ELISA试剂盒——研晶

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一抗,多抗,荧光标记抗体,大鼠elisa试剂盒,人elisa,小鼠elisa,兔子elisa,对照品细胞,科研试剂等

一抗,多抗,荧光标记抗体,大鼠elisa试剂盒,人elisa,小鼠elisa,兔子elisa,对照品细胞,科研试剂等上海研晶试剂抗体网是一家专门从事生物技术相关产品研发和销售的综合性生物科学公司。主要经营ELISA试剂盒、细胞、血清、抗体、金标试剂盒、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、毒素、移液器等产品,产品国内大部分地区。公司专注于高品质抗体资源的整合和研发,致力于以高水平的专业服务,积极推动中国生物产业和市场的发展。上海瑞齐生物科技拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的服务,能够及时解决和满足客户的各方面的需求,与国内多家企业建立了良好的*合作关系,在市场上树立了公司的良好信誉和形象。



公司主要产品涉及:Elisa检测试剂盒 生物试剂 细胞/细胞株 抗体试剂 培养基 标准品 动物血清 胎牛血清 放免试剂盒 化学发光底物试剂盒 麦氏比浊管 食品安全快速监测仪 色谱柱 食品及农残检测试剂盒 耗材仪器试剂 金标试剂盒。 以上试剂及耗材,我公司*备有大量库存,可现货供应,为广大客户带来方便。 对所有的客户和朋友,本公司一贯坚持提供较好服务,这个承诺不会随着时间的改变而改变。我们将不断的与各优秀生命科学产品厂商联系,尽力做好与您的需求连接,满足您的实验需要,并为您提供质量较好的产品和技术支持。你的满意是我们的动力源泉。我们的发展壮大离不开你们的支持。

 

详细信息

Anti-MKP-1/DUSP1/FITC【FITC.PE.APC各类标记】产品经无数次市场验证,若出现质量问题可无条件换货或退货。

上海研晶生物公司备有上万种产品!所有生化试剂产品都具有类似以下产品价格优势,质量保证!欢迎新老客户垂询!

1.一抗及标记一抗抗体  2.二抗及标记二抗抗体  3.蛋白及抗原 4 .人Elisa试剂盒  5.小鼠Elisa试剂盒 6.大鼠Elisa试剂盒  7.豚鼠Elisa试剂盒  8.猪Elisa试剂盒  9.鸡Elisa试剂盒  10.各种动物Elisa试剂盒  11.植物Elisa试剂盒  12.微生物Elisa试剂盒  13.分离试剂  14.酶与辅酶  15.蛋白质  16.抗生素  17.放免试剂盒  18.各种动物细胞株、细胞系.....  等等
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订货:021-61558430,
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抗体中英文名称:
Anti-MKP-1/DUSP1/FITC【FITC.PE.APC各类标记】

抗体种属:兔抗单克隆抗体,鼠抗单克隆抗体抗体的浓度为1mg/ml。

抗体的相关标记:

HRP,Biotin,Gold,RBITC,AP,FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7,PE,PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7,APC,Alexa Fluor 350,Alexa Fluor 488,Alexa Fluor 555,Alexa Fluor 647抗体的交叉反应:人,小鼠,大鼠,鸡 ,狗,猪,羊,牛,兔等......

抗体的应用:可以用于做石蜡切片免疫组化,冰冻切片免疫组化,Elisa,WB,免疫荧光等实验。公司备有抗体及以下抗体做免疫组化与WB所需的二抗

抗体应用的稀释:

FCM:  1:50-200 

·IF : 1:50-1:200 

· Immunocytochemistry: 1:50-1:200 

· Excitation spectrum: 540 nm 

· Emission spectrum: 625 nm 

1、Western Blotting (starting dilution 1:200, dilution range1:100-1:1000)

2、Immunoprecipitation [1-2 µg per 100-500 µg of total protein(1 ml ofcell lysate)]

3、Immunofluorescence (starting dilution 1:50, dilution range 1:50-1:500)

4、ELISA (starting dilution 1:30, dilution range 1:30-1:3000)

5、Immunohistochemistry(including paraffin-embedded sections) (starting dilution 1:50dilution range 1:50-1:500)

Anti-MKP-1/DUSP1/FITC【FITC.PE.APC各类标记】产品免疫组化反应:

免疫组化实验原理:

抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。

免疫组织化学技术按照标记物的种类:

免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。

这些常用免疫组织化学方法的原理:

1. 免疫荧光细胞化学技术:将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量。

2. 免疫酶细胞化学技术:是目前免疫组织化学研究中zui常用的技术.基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。

3. 免疫胶体金技术:就是用胶体金标记一抗,二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性,定位或定量研究.由于胶体金的电子密度高,多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究。

产品WB实验中的对照系统:

Western blotting实验原理:免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。WB对照系统:阳性对照:有标准品,或阳性血清、阳性上清。阴性对照:测血时用相应小鼠未免疫血清,测培养上清,用无克隆培养上清。空白对照:不加一抗,用1%BSA代替。无关对照(替代对照):用无关项目一抗,或无关项目的抗体

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抗体的生物素化标记基本原理 :本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。

试剂及仪器 :NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素;0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液,pH 8.0;DMSO(二甲亚砜,有毒试剂);1 mol/L NH4Cl;叠氮钠(有毒试剂);PBS;10g/L牛血清白蛋白(W/W)PBS液;分子筛柱(如G25);电磁搅拌器;透析袋(MW CO 8000);铝铂等。

操作步骤

1.将待生物素化的蛋白质用0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液(pH 8.0)或0.5 mol/L硼酸缓冲液(pH 8.6)稀释到1mg/ml,一般实验室应用的生物素化体积为1~2.5ml;

2.交互用0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液(pH 8.0)或0.5 mol/L硼酸缓冲液(pH 8.6),对蛋白质充分透析;

3.用1ml DMSO 溶解NHSB 1mg;

4.向1ml蛋白质溶液(即含蛋白质1mg)加入120μl NHSB溶液(即含NHSB 120 μg);

5.在室温下持续搅拌,保温2~4小时;

6.加入9.6μl 1mol/L NH4Cl (每25μg NHSB加1μl),在室温下搅拌10分钟;

7.在4℃,对PBS充分透析,以除去游离的生物素;

8.将样品上1ml的分子筛柱,以PBS缓慢洗脱,收集1ml/管,蛋白质在1~3ml之间洗下;

9.zui后,样品加入叠氮钠(终浓度0.5g/L)及1.0g/L BSA。将结合产物置4℃,避光保存,亦可加入50%重蒸甘油,置―20℃保存。

质量监测

与酶-或荧光染料-结合的亲和素、链霉亲和素或中和亲和素(neutravidin),通过标准方法(Western blotting 或免疫荧光染色法)测定交联率。 

实验要点及说明

1、如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5 mol/L硼酸缓冲液充分透析;

2、所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选zui适条件;

3、用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;

4、由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如Triton X-100,Tween 20等。

5、当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性。此时,应试用其它交联方法;

6、生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合(详见参考文献1)

7、交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;

8、在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

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