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Bradford蛋白浓度测定试剂盒
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
详细信息
Bradford Protein Quantification Kit
Bradford蛋白浓度测定试剂盒
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格（元） |
Bradford Protein Quantification Kit | 20202ES76 | 500T | 4℃ | 98.00 |
Bradford蛋白浓度测定试剂盒 | 20202ES86 | 2500T | 4℃ | 398.00 |
产品描述
Bradford蛋白浓度测定法是目前常用的灵敏度较高的蛋白浓度测定方法之一。它是根据Bradford染液（考马斯亮蓝G-250染料）与蛋白结合，使染料的zui大吸收峰从A456变为A595，且测定的吸光值与蛋白浓度成正比关系的原理设计的。本法通过吸光值，推算蛋白浓度，实现了蛋白浓度测定的快速性和简便性。灵敏度高，比Lowry法大约高四倍，zui低蛋白检测量可达1μg。测定速度快、简单，仅需一种试剂即可，且不受大多数样品中化学试剂的影响。
我司提供二种规格的Bradford蛋白浓度检测试剂盒，比色皿法分别可做125次和625次。酶标法分别可做500次和2500次。
产品组分
编号 | 组分 | 产品编号/规格 | |
20202ES76 (500T) | 20202ES86 (2500T) | ||
20202-A | Bradford蛋白染色液 | 125ml | 5×125 ml |
20202-B | 蛋白标准品（BSA） | 5×1ml（2mg/ml） | 5×2ml（2mg/ml） |
运输与保存方法
冰袋运输。
染色液4℃保存，蛋白标准品常温或4℃保存，有效期一年。
注意事项
1）Bradford染色液使用前，应充分混匀。同时，酶标仪需预热20min。
2）Bradford染色液需恢复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。另，使用前需颠倒几次以充分混匀。
3）由于Bradford染液的颜色反应并不是同递增的蛋白浓度呈线性关系，因此每次试验都必须建立标准曲线。另外，为了得到更精确的结果，每个蛋白梯度和样品均需做复孔。
4）Bradford法测定蛋白浓度对大多数化学物质的兼容性比较好，比如对还原剂DTT的兼容性高达5mM。但会受到略高浓度的去垢剂影响，如，SDS需低于0.01%，Triton X-100低于0.05%，Tween 20/ 60/80低于0.015%等。对于含去垢剂的样品，建议使用BCA增强型蛋白定量检测试剂盒【货号：20201ES76】。
5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作方法
一、配制标准品
1. 配制BSA标准品体系
【注】：标准品稀释液为蛋白样品的溶解液，原则上蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但也可用0.9%的NaCl或1×PBS进行稀释。
BSA标准品体系配制可参考表一。
表一BSA标准品体系配制（微孔板检测，线性范围100-1500μg/ml）
Vial | 稀释液体积(μl) | 2mg/ml BSA体积(μl) | BSA终浓度(μg/ml) |
A | 0 | 100 | 2000 |
B | 25 | 75 | 1500 |
C | 50 | 50 | 1000 |
D | 125 | 75 | 750 |
E | 150 | 50 | 500 |
F | 350 | 50 | 250 |
G | 375 | 25 | 125 |
H | 395 | 5 | 25 |
I | 400 | 0 | 0=Blank |
二、检测方法
A. 标准比色皿检测（线性范围：100-1500μg/ml）
1）各取20μl不同浓度标准品和待测样品加入到反应管中；
2）加入1ml Bradford染色液，混匀。室温孵育10min。【注】：样本室温孵育时间不可超过1h；
3）分光光度计上测定595nm处的吸光度，用装满水的比色皿对仪器校零。之后测定所有样本浓度。
4）根据BSA标准品的吸光度（减去标准品中空白孔的OD值即zui终的读数），绘制标准曲线（X-蛋白浓度μg/ml；Y-zui终的OD595nm）。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度。
B. 标准微孔板检测（线性范围：100-1500μg/ml）
1）各取5μl各浓度标准品和待测样品加入到微孔板中；
2）每孔加入250μl Bradford染色液，振荡30s充分混匀。盖上微孔板，室温孵育10min。【注】：样本室温孵育时间不可超过1h；
3）酶标仪上测定595nm处的吸光度。或者其他575~615nm波长范围内的吸光度，但是相对于595nm，吸光度会存在~10%的损失。
4）根据BSA标准品的吸光度（减去标准品中空白孔的OD值即zui终的读数），绘制标准曲线（X-蛋白浓度μg/ml；Y-zui终的OD595nm）。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度。
【注】：a）由于酶标板的光径比比色皿短，经酶标板检测得到的OD595nm会低于比色皿检测所得，因此可能降低本法的检测下限。要得到更高的OD595nm，可使用7-10μl标准品/待检样本，和250μl Bradford染色液来进行检测。b）如果使用与酶标仪相关的曲线拟合算法（curve fitting algorithm），那么四参数或者*拟合曲线可能得到更为精确的结果，并不是单纯的线性拟合。若是手动标记各点浓度，点-点曲线出来的结果精确于线性拟合。若对结果准确性的要求不是非常严格，可使用线性拟合分析数据。
附录
表：Brandford蛋白浓度测定的兼容性
名称（盐/缓冲液） | 耐受浓度 |
ACES, pH 7.8 | 100mM |
Ammonium sulfate | 1M |
Asparagine | 10mM |
Bicine, pH 8.4 | 100mM |
Bis-Tris, pH 6.5 | 100mM |
Borate (50mM), pH 8.5 | undiluted |
Calcium chloride in TBS, pH 7.2 | 10mM |
Na-Carbonate/Na-Bicarbonate (0.2M), pH 9.4 | undiluted |
Cesium bicarbonate | 100mM |
CHES, pH 9.0 | 100mM |
Na-Citrate (0.6M), Na-Carbonate (0.1M), pH 9.0 | undiluted |
Na-Citrate (0.6M), MOPS (0.1M), pH 7.5 | undiluted |
Cobalt chloride in TBS, pH 7.2 | 10mM |
EPPS, pH 8.0 | 100mM |
Ferric chloride in TBS, pH 7.2 | 10mM |
Glycine | 100mM |
Guanidine?HCl | 3.5M |
HEPES, pH 7.5 | 100mM |
Imidazole, pH 7.0 | 200mM |
MES, pH 6.1 | 100mM |
MES (0.1M), NaCl (0.9%), pH 4.7 | undiluted |
MOPS, pH 7.2 | 100mM |
Nickel chloride in TBS, pH 7.2 | 10mM |
PBS; Phosphate (0.1M), NaCl (0.15M), pH 7.2 | undiluted |
PIPES, pH 6.8 | 100mM |
RIPA lysis buffer; 50mM Tris, 150mM NaCl,0.5% DOC, 1% NP-40, 0.1% SDS, pH 8.0 | 1/10 dilution* |
Sodium acetate, pH 4.8 | 180mM |
Sodium azide | 0.5% |
Sodium bicarbonate | 100mM |
Sodium chloride | 5.0M |
Sodium citrate, pH 4.8 or pH 6.4 | 200mM |
Sodium phosphate | 100mM |
Tricine, pH 8.0 | 100mM |
Triethanolamine, pH 7.8 | 100mM |
Tris | 2M |
TBS; Tris (25mM), NaCl (0.15M), pH 7.6 | undiluted |
Tris (25mM), Glycine (192mM), pH 8.0 | undiluted |
Tris (25mM), Glycine (192mM), SDS (0.1%), pH 8.3 | 1/2 dilution* |
Zinc chloride in TBS, pH 7.2 | 10mM |
名称（变性剂） | 耐受浓度 | 还原剂以及巯基试剂 | 耐受浓度 |
Brij?-35 | 0.125% | Dithiothreitol (DTT) | 5mM |
Brij-56, Brij-58 | 0.031% | Glucose | 1M |
CHAPS, CHAPSO | 5.0% | Melibiose | 100mM |
Deoxycholic acid | 0.05% | 2-Mercaptoethanol | 1M |
Lubrol? PX | 0.125% | Potassium thiocyanate | 3M |
Octyl β-glucoside | 0.5% | Thimerosal | 0.01% |
Nonidet P-40 (NP-40) | 0.5% | Misc. Reagents & Solvents | 耐受浓度 |
Octyl β-thioglucopyranoside | 3.0% | Acetone | 10% |
SDS | 0.125% | Acetonitrile | 10% |
Span? 20 | 0.5% | Aprotinin | 10mg/L |
Triton? X-100, X-114 | 0.125% | DMF, DMSO | 10% |
Triton X-305, X-405 | 0.5% | Ethanol | 10% |
Tween?-20 | 0.062% | Glycerol (Fresh) | 10% |
Tween-60 | 0.1% | Hydrochloric Acid | 100mM |
Tween-80 | 0.062% | Leupeptin | 10mg/L |
Zwittergent? 3-14 | 0.025% | Methanol | 10% |
螯合剂 | 耐受浓度 | Phenol Red | 0.5mg/mL |
EDTA | 100mM | PMSF | 1mM |
EGTA | 2mM | Sodium Hydroxide | 100mM |
Sodium citrate | 200mM | Sucrose | 10% |
还原剂以及巯基试剂 | 耐受浓度 | TLCK | 0.1mg/L |
N-acetylglucosamine in PBS, pH 7.2 | 100mM | TPCK | 0.1mg/L |
Ascorbic acid | 50mM | Urea | 3M |
Cysteine | 10mM | o-Vanadate (sodium salt), in PBS, pH 7.2 | 1mM |
Dithioerythritol (DTE) | 1mM |
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