兼容常规与链特异性mRNA文库构建

Hieff NGS® MaxUp II Dual-mode mRNA Library Prep Kit for Illumina

——兼容常规与链特异性mRNA文库构建

背景简介

RNA被认为是生物信息传递的“桥梁”。而转录组测序可利用NGS技术对组织或者细胞中的RNA反转录之后的cDNA文库测序，通过分析可计算不同RNA的表达量、发现新的转录本、进行转录本定位、分析可变剪切、检测基因融合等，提供全面的转录组信息。

图 遗传学中心法则

目前主流的mRNA建库主要流程是mRNA纯化，mRNA逆转录，双链cDNA合成，末端修复，A尾添加，接头连接，纯化/分选，文库扩增，时间上需要1.5 d甚至更久。

翊圣生物结合自身多年的分子酶创新研发经验，推出升级版快速mRNA建库试剂盒，可在短的时间进行建库。助力获得优异的转录组测序数据。

亮点一览

1、建库快速：完整建库比主流方法缩减1.5-2 h，1 d内获得高质量文库。

图 升级版建库试剂盒建库流程

2、兼容常规与链特异性文库构建

本产品搭配两种二链合成buffer，即含dNTP（常规建库）与dUTP（链特异性建库），可兼容两种模式的mRNA文库构建。一个盒子两种用处，不用再额外备货。

3、逆转录酶，更适合复杂模板

RNaseH能特异的降解RNA-DNA杂交分子中RNA的特性，将RNA降解成小片段，影响反转录效率。YEASEN提供的第四代Hifair逆转录酶，去除RNase H活性，同时温度的耐受性高达65℃，有利于复杂RNA模板二级结构的打开，更利于逆转录的进行。

硬核支撑

以1 μg的标准品RNA（Agilent#740000）为起始，分别构建链特异性文库和非链特异性文库，质控后的文库用illumina Hiseq X-10 PE150测序。

a. 优异的测序质量

b. 表达重复性高

c. 优异的文库均一性

d. rRNA残留更低，有用数据更多

e. 链特异性建库：98.5%的Reads比对到正义链上

客户案例

单位：广州某生物公司J*

样本：草莓，油菜，核盘菌

结论：高质量文库，优异的测序数据

a. 文库报告

b. 测序质量

c. 数据比对

d. 数据分布

e. 基因覆盖度分析

单位：上海某生物公司O*

样本：人，大鼠，西瓜

结论：高质量文库，优异的测序数据

a. 建库报告

b. 测序质量

c. 数据比对

d. 数据分布

e. 基因覆盖度分析

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