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YW2 考马斯亮蓝法测蛋白含量测定
高级会员第15年
生产厂家北京索莱宝科技有限公司
(Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. )是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京,并在设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,拥有专业的研发和质量检测团队以及的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到科研工作者的认可,成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员,我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广,品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时,索莱宝公司提供各种常规生化试剂,库存常备产品多达10000多种,可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面,索莱宝谨记公司信念:质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程,科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序,我们恪守对每一位用户的承诺:用专业的态度做专业的品牌。同时,公司组建了一支专业的技术服务队伍,能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
索莱宝公司坚持与接轨,注重和企业的合作与交流,并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作,不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念:“为科研服务,为生命尽责”。一个人能够走多远,取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。
索莱宝诚招生物试剂研发人员,期待与广大同行精诚合作,为广大科研工作者提供优质的产品,高效的物流以及专业的售后服务。索莱宝感谢所有朋友的支持与帮助,您的支持是我们前进的动力和保障。让我们携手同行,共同创造美好的明天。
货号:YW2
规格:50T/48
产品简介 :
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
在酸性溶液中,考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在 595nm 处有大吸收峰,其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分析。
聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺在加速剂N,N,N,N—四甲基乙二胺(简称TEMED)和催化剂过硫酸铵(简称AP)或核黄素(即vitamin B2)的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳
(polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE)
SDS-PAGE是在要电泳的样品中加入含有SDS和β-巯基乙醇(或者DTT)的样品处理液,SDS可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,β-巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构。SDS还与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时各种蛋白质分子本身的电荷*被SDS掩盖。这样电泳时,就消除了各种蛋白质本身电荷及结构上的差异,电泳速度只是与蛋白质分子量有关。用本法测定蛋白质的分子量只需根据待测蛋白质在已知分子量的标准蛋白质图中的位置,就能得知分子量。
试验中所需的仪器和试剂:
酶标仪、酶标板、移液器和蒸馏水。
产品内容 :
试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。
标准品:液体×1 瓶,4℃保存。
操作步骤 :
一 、 样品中可溶性蛋白质提取 :
液体样品:澄清无色液体样品可以直接测定。
组织样品:准确称取约 0.1 g 样品,加 1mL 提取液( 自备,根据需要可以是酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水) ,冰浴匀浆,10000rpm,4℃离心 10min,取上清,即待测液。 (动物样品常常需要稀释)
二 、 吸光值测定 :
1. 分光光度计仪预热 30 min 以上,调节波长到 595nm,蒸馏水调零。
2. 空白 管: 取 1mL 玻璃比色皿, 加入 200µL 蒸馏水, 1000µL 试剂一, 混匀后室温静置 10min, 于 595nm测定吸光度,10~20min 内完成测定,记为 A 空白管。
3. 标准 管: 取 1mL 玻璃比色皿, 加入 200µL 标准液, 1000µL 试剂一, 混匀后室温静置 10min, 于 595nm测定吸光度,10~20min 内完成测定,记为 A 标准管。
4. 测定 管:取 1mL 玻璃比色皿板,加入 200µL 待测液,1000µL 试剂一,混匀后室温静置 10min,于595nm 测定吸光度,10~20min 内完成测定,记为 A 测定管。
蛋白质含量 计 算 :
C 待测(µg/m L)= C 标准管×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)=50×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
C 标准管:标准品蛋白质浓度,50µg/mL。
注意事项 :
1.加考马斯亮蓝后,在 10~20min 内吸光值相对较稳定,因此须在 10~20min 完成比色。
2.不宜用石英比色皿,可用玻璃或塑料比色皿,测完成后立即用 95%乙醇冲洗。
3.测定前用 1~2 个样做预实验,确保蛋白浓度在 0~100µg/ml 范围内,否则需要做相应稀释。
考马斯亮蓝法测蛋白含量测定订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。
运输说明:
1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。