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BC5820-50T/48S 白蛋白含量检测试剂盒
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- BC5820-50T/48S
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北京索莱宝科技有限公司
（Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. ）是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京，并在设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，索莱宝公司提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，索莱宝谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
索莱宝公司坚持与接轨，注重和企业的合作与交流，并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作，不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念：“为科研服务，为生命尽责”。一个人能够走多远，取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。
索莱宝诚招生物试剂研发人员，期待与广大同行精诚合作，为广大科研工作者提供优质的产品，高效的物流以及专业的售后服务。索莱宝感谢所有朋友的支持与帮助，您的支持是我们前进的动力和保障。让我们携手同行，共同创造美好的明天。
详细信息
白蛋白含量检测试剂盒（溴甲酚紫显色法）说明书
可见分光光度法
货号：BC5820
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 液体0.24 mL×1支 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 2-8℃保存 | |
试剂三 | 液体0.8 mL×1支 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体1 mL×1支 | -20℃保存 |
溶液的配制：
1、 显色液：临用前根据样本数量按照试剂一：试剂二：试剂三=10μL: 3990μL :40μL（4040μL，4T）的比例配制显色液，充分混匀，现配现用；
2、 标准品：10mg/mL白蛋白标准液。临用前取50μL10mg/mL白蛋白标准液，加入150μL提取液，配制成2.5mg/mL白蛋白标准液，现配现用。
产品说明：
白蛋白是人体血浆中最主要的蛋白质，由肝脏合成，是人体内一种重要的营养物质，可以维持血浆渗透压，并可与多种营养物质、激素和药物相结合。白蛋白含量可以反映机体营养状态，也可排查影响肝脏代谢功能的疾病，如肝硬化、肝损伤、营养不良、恶性肿瘤等。
在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫（Bromocresol Purple，BCP）结合生成绿色复合物，在603nm处有特定吸收峰，该复合物吸光值与白蛋白浓度成正比。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、低温离心机、分析天平、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1. 组织样本：按质量（g）: 提取液体积（mL）1 : 5~10比例加入提取液（建议称取0.1g样本，加入1.0mL提取液），冰浴匀浆后，于4℃，8000g，离心10min，弃沉淀，取上清液置于冰上待测。
2. 细菌/细胞样本：按细菌/细胞数量（106）：提取液体积（mL）5~10: 1的比例加入提取液（建议5百万细菌/细胞加入1.0mL提取液），冰浴超声破碎细菌/细胞（功率200W，超声3s，间隔7s，总时间5min），然后于4℃，8000g，离心10min，弃沉淀，取上清液置于冰上待测。
3. 液体样本：直接测定。若液体有浑浊则离心取上清测定。
二、测定步骤
1．可见分光光度计预热30min以上，调节波长至603nm，蒸馏水调零。
2．操作表：（1mL玻璃比色皿中加入下列试剂）
试剂名称（μL） | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
样本 | 100 | - | - |
标准品 | - | 100 | - |
提取液 | - | - | 100 |
显色液 | 1000 | 1000 | 1000 |
混匀，常温静置1min，于603nm处测定各管吸光值，分别记为A测定、A标准和A空白，计算ΔA测定=A测定-A空白，ΔA标准=A标准-A空白。空白管和标准管只需测1-2次。 注意：静置时间长短会影响检测结果，建议直接在1mL玻璃比色皿中直接反应1min，测定吸光值。 | |||
三、白蛋白含量计算
1. 按样本蛋白浓度计算
白蛋白含量（mg/mg prot）= ΔA测定×（C标÷ΔA标准）×V样÷（V样×Cpr）=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr
2. 按样本质量计算
白蛋白含量（mg/g 质量）= ΔA测定×（C标÷ΔA标准）×V样÷（W×V样÷V样总）=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W
3. 按细菌/细胞数量计算
白蛋白含量（mg/106 cell）=ΔA测定×（C标÷ΔA标准）×V样÷（V样×N÷V样总）=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷N
4. 按液体体积计算
白蛋白含量（mg/mL）= ΔA测定×（C标÷ΔA标准）×V样÷V样= 2.5×ΔA测定÷ΔA标准
C标：标准管浓度，2.5mg/mL；V样：加入样本体积，0.1mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；N：细菌/细胞总数，以106计。
注意事项：
1、 如果∆A测定小于0.005或测定管吸光值接近空白管，可以增加样本量后再进行测定；如果∆A测定大于0.5，建议将样本上清用提取液适当稀释后再进行测定。注意同步修改计算公式。
2、 如果样本加入显色剂后出现浑浊，建议将样本上清用提取液适当稀释后再进行测定。注意同步修改计算公式。
实验实例：
1. 取100μL人血清样本，用提取液稀释10倍，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算：ΔA测定=A测定-A空白=0.524-0.121= 0.403，ΔA标准=A标准-A空白=0.387-0.121=0.266，按液体体积计算得：
白蛋白含量（mg/mL）=2.5×ΔA测定÷ΔA标准×10 =37.876 mg/mL。
参考文献：
[1] Tada S, Yasukawa K, Yatomi Y, et al. A simple colorimetric assay to determine the concentration and proportion of human mercaptalbumin[J]. Practical Laboratory Medicine, 2022, 31: e00281.
[2] Muramoto Y , Matsushita M , Irino T .Reduction of reaction differences between human mercaptalbumin and human nonmercaptalbumin measured by the bromcresol purple method[J].Clinica Chimica Acta, 1999, 289(1-2):69-78.
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