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BC0740-50T/48S 己糖激酶(HK)活性检测试剂盒 糖酵解系列
- 型号
- BC0740-50T/48S
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北京索莱宝科技有限公司
（Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. ）是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京，并在设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，索莱宝公司提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，索莱宝谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
索莱宝公司坚持与接轨，注重和企业的合作与交流，并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作，不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念：“为科研服务，为生命尽责”。一个人能够走多远，取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。
索莱宝诚招生物试剂研发人员，期待与广大同行精诚合作，为广大科研工作者提供优质的产品，高效的物流以及专业的售后服务。索莱宝感谢所有朋友的支持与帮助，您的支持是我们前进的动力和保障。让我们携手同行，共同创造美好的明天。
详细信息
己糖激酶（HK）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0740
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂五 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂六 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂二：临用前加入30 mL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存4周；
2、试剂四：临用前加入5mL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存4周；
3、试剂五：临用前加入3mL 蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存4周；
4、试剂六：临用前取1支试剂六加入125 μL试剂一和125 μL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存2周。（该试剂为冻干试剂，可能存在肉眼观察试剂量相差较大甚至量很少的现象，此现象不影响使用，实际质量相同）
产品说明：
己糖激酶（Hexokinase，HK，EC 2.7.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶，催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH，NADPH 在340nm有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
比色皿中反应液的温度必须保持37℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。
不同匀浆组织中HK活力不一样，做正式试验之前请做1-2次预试验，若ΔA>0.5，则说明组织活力太高，必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液，或缩短反应时间至2min，使ΔA<0.5，以提高检测灵敏度。注意同步修改计算公式。
实验实例：
称取约0.1g 鼠肾，加入1mL提取液，进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清用提取液稀释5倍后置冰上待测。之后按照测定步骤操作，用1mL石英比色皿测得计算A1=0.2252，A2=0.3084，ΔA=A2-A1=0.0832，计算己糖激酶活性得：HK活性（U/g 质量）=1113×ΔA÷W×稀释倍数=4630.08U/g 质量
称取约0.1g 绿萝，加入1mL提取液，进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。之后按照测定步骤操作，用1mL石英比色皿测得计算A1=0.1949，A2=0.2184，ΔA=A2-A1=0.0235，计算己糖激酶活性得：HK活性（U/g 质量）=1113×ΔA÷W=261.56U/g 质量
相关发表文献：
Geng M T, Yao Y, Wang Y L, et al. Structure, expression, and functional analysis of the hexokinase gene family in cassava[J]. International journal of molecular sciences, 2017, 18(5): 1041.
Zhou F, Du J, Wang J. Albendazole inhibits HIF-1α-dependent glycolysis and VEGF expression in non-small cell lung cancer cells[J]. Molecular and cellular biochemistry, 2017, 428(1-2): 171-178.
Liu Y, Liang X, Zhang G, et al. Galangin and pinocembrin from propolis ameliorate insulin resistance in HepG2 cells via regulating Akt/mTOR signaling[J]. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2018, 2018.
Jing Li,Yabing Duan,Chuanhong Bian,et al. Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum: Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance. Pesticide Biochemistry and Physiology. January 2019;153:152-160.(IF2.87)
参考文献：
Pancera S M, Gliemann H, Schimmel T, et al. Adsorption behavior and activity of hexokinase[J]. Journal of colloid and interface science, 2006, 302(2): 417-423.
[1] Galina A, da Silva WS. Hexokinase activity alters sugar-nucleotide formation in maize root homogenates[J]. Phytochemistry, 2000, 53(1): 29-37.
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