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MMS19,DNA修复甲基磺酸敏感性基因19抗体
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产品编号 BYK-8671R
英文名称 MMS19
中文名称 DNA修复甲基磺酸敏感性基因19抗体
别 名 MET18MMS19 nucleotide excision repair homolog; methyl methanesulfonate sensitivity gene19; MMS19L; MMS-19L; MMS 19 nucleotide excision repair homolog MET18.
分 子 量 113kDa
细胞定位 细胞核
性 状 Lyophilized or Liquid
浓 度 1mg/ml
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MMS 19:851-950/1030
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C
MMS19,DNA修复甲基磺酸敏感性基因19抗体免疫组化操作流程
(一) 仪器设备
1. 18cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉.
2. 水浴锅
(二) 试 剂
1. PBS缓冲液(ph7.2―7.4):NaC137mmol/L,KCl 2.7mmol/L ,Na2HPO4 4.3mmol/L,
KH2PO4 1.4mmol/L.
2.0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(CB,ph6.0,1000ml):柠檬酸三钠3g,柠檬酸0.4g。
3.0.5mol/L EDTA缓冲液(ph8.0):700ml水中溶解186.1g EDTA&
8226;2H2O,用10mmol/L
NaOH调至ph8.0,加水至1000ml.
4. 1mol/L的TBS缓冲液(ph8.0):在800ml水中溶解121gTris碱,用1N的HCl调至ph8.0,加水1000ml。
5. 酶消化液:a. 0.1%胰蛋白酶:用0.1%CaCl 12(ph7.8)配制。b.0.4%胃蛋白酶液:用0.1N的HCl配制。
6. 3%甲醇―H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配制
7. 风裱剂:a. 甘油和0.5mmol/L碳酸盐缓冲液(ph9.0–9.5)等量混合
b 油和TBS(PBS)配制
8.TBS/PBS PH9.0–9.5,适用于荧光纤维镜标本;ph7.0-7.4适合光学纤维标本。
(三) 操作流程
1 脱蜡和水化:脱蜡前应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。 a 组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯后在浸泡10分钟
b 无水乙醇中浸泡五分钟
c 95%乙醇中浸泡五分钟
d 75%乙醇中浸泡五分钟
2 抗原修复:用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片:
A 抗原热修复
a 高压热修复 在沸水中加入EDTA(ph8.0)或0.01m枸橼酸钠缓冲溶液(ph6.0).盖上不锈钢锅盖,但不能锁定。将玻片置于金属染色加上,缓慢加压,是玻片在缓冲液中浸泡五分钟,然后将盖子锁定,小阀门将会升起来。10分钟后除去热源,置入凉水中,当小阀门沉下去后打开盖子。此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。
b 沸热修复 电炉或水浴锅加热0.01枸橼酸钠缓冲液(ph6.0)至95℃左右,放入组织芯片加热10-15分钟。
C 微波炉加热 在微波炉里加热0.01枸橼酸钠缓冲液(ph6.0)至沸腾后将组织芯片放入,断电,间隔5-10分钟,反复1-2次。
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