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BC5925-100T/96S 果糖激酶(FRK)活性检测试剂盒 微量法
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- BC5925-100T/96S
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北京索莱宝科技有限公司
（Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. ）是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京，并在设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，索莱宝公司提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，索莱宝谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
索莱宝公司坚持与接轨，注重和企业的合作与交流，并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作，不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念：“为科研服务，为生命尽责”。一个人能够走多远，取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。
索莱宝诚招生物试剂研发人员，期待与广大同行精诚合作，为广大科研工作者提供优质的产品，高效的物流以及专业的售后服务。索莱宝感谢所有朋友的支持与帮助，您的支持是我们前进的动力和保障。让我们携手同行，共同创造美好的明天。
详细信息
果糖激酶（FRK）活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC5925
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体110mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
粉剂一 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
试剂三 | 液体3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 液体12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂五 | 液体8μL×2支 | -20℃保存 |
试剂六 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
溶液的配制：
1. 提取液：临用前将粉剂一溶于提取液中；该试剂为悬浊液，使用前摇匀即可，2-8℃保存12周；
1. 试剂一：试剂放于试剂瓶内玻璃管中。临用前加入2.667mL蒸馏水，充分溶解。溶解后的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；
2. 试剂二：试剂放于试剂瓶内玻璃管中。临用前加入3.03mL蒸馏水，充分溶解。溶解后的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；
3. 试剂三：试剂放于试剂瓶内玻璃瓶中，临用前加入6mL蒸馏水溶解，溶解后的试剂2-8℃分装保存4周；
4. 试剂五工作液：临用前根据样本数量按照试剂五：蒸馏水=8μL:1000μL（共1008μL，约100T）的比例配制，充分混匀，现配现用；为了延长使用时间，此产品多给1支。
5. 试剂六：临用前取一支试剂六加入1mL蒸馏水，充分溶解。溶解后的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融。（该试剂为冻干试剂，可能存在不同瓶间肉眼观察试剂量相差较大甚至量很少的现象，此现象不影响使用，实际质量相同）
产品说明：
果糖激酶（Fructokinase，FRK，EC 2.7.1.4）是催化果糖磷酸化的主要酶。果糖激酶可以作为植物的己糖感受器和信号分子，通过影响植物的生长周期来调控植物的代谢和生长发育进程，果糖磷酸化对于维持淀粉生物合成方向具有重要意义。
FRK催化果糖合成6-磷酸果糖，6-磷酸果糖在磷酸己糖异构酶的作用下异构为6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADH，NADH在340nm有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、分析天平、水浴锅/恒温培养箱、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体的操作步骤请见“产品资料”文件
注意事项：
1. 如果∆A小于0.005，可以增加样本量或延长反应时间再进行测定；如果∆A测定大于0.6或A1测定小于A1空白，建议将样本稀释或者缩短反应时间再进行测定。注意同步修改计算公式。
实验实例：
1. 取0.1023g土豆组织样本，加入提取液进行冰浴匀浆，离心后取上清，按照测定步骤操作，用微量石英比色皿测得计算：ΔA测定=A2测定-A1测定=0.137-0.080=0.057，ΔA空白=A2空白-A1空白=0.001-0.001=0，ΔA=ΔA测定- ΔA空白=0.057。按样本质量计算得：
FRK活性（U/g 质量）=321.54×ΔA÷W = 179.157U/g 质量。
2. 取0.06g酵母粉，加入提取液进行冰浴匀浆，离心后取上清，按照测定步骤操作，用微量石英比色皿测得计算：ΔA测定=A2测定-A1测定=0.705-0.202=0.503，ΔA空白=A2空白-A1空白=0.001-0.001=0，ΔA=ΔA测定- ΔA空白=0.503。按样本质量计算得：
FRK活性（U/g 质量）=321.54×ΔA÷W =2695.58U/g 质量。
参考文献：
[1] Giroix M H, Jijakli H, Courtois P, et al.Fructokinase activity in rat liver, ileum, parotid gland, pancreas, pancreatic islet, B and non-B islet cell homogenates.[J].International Journal of Molecular Medicine, 2006, 17(3):517-522.
[2] Kurt, Bergbauer, Ralf, et al. Studies on Fructose Metabolism in Cultured Astroglial Cells and Control Hepatocytes: Lack of Fructokinase Activity and Imrrunoreactivity in Astrocytes[J].Developmental Neuroscience, 2009, 18(5-6):371-379.
[3] Schaffer A A, Petreikov M. Inhibition of fructokinase and sucrose synthase by cytosolic levels of fructose in young tomato fruit undergoing transient starch synthesis[J].Physiologia Plantarum, 2010, 101(4):800-806.
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