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RNA Pulldown、DNA Pull-down
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上海研谨生物科技有限公司提供RT-PCR技术服务、细胞培养技术服务、原位杂交技术服务、免疫沉淀技术服务、Western Blotting技术服务、PCR实验服务，并为广大科研用户提供各种高品质的化学试剂、生物学试剂、免疫学检测，ELISA试剂盒、生化试剂盒、分析标准品、对照品、标准物质、食品安全检测试剂、动物疫病类检测产品、兽药残留检测试剂、细胞培养服务等，应用覆盖药物分析领域、食品安全领域、聚合物研究领域、环境监测领域，客户广泛分布于食品、制药、第三方检测、环境测试机构、化工、科研院校、生物工程等行业。
主营：
1生化试剂、标准品对照品、标准物质、
2.ELISA试剂盒、分离液、分离液试剂盒
3.细胞：*细胞、国产肿瘤细胞、国产正常细胞、肿瘤耐药细胞
4.食品安全检测试剂、动物疫病类检测产品、兽药残留检测试剂
5.耗材：常用实验耗材、移液器
详细信息
RNA Pulldown、DNA Pull-down
实验意义：
核酸与蛋白质的互作是细胞功能的核心，包括蛋白质合成、mRNA组装等生命活动中重要的代谢过程，研究核酸与蛋白质的互作是研究生命科学的基本工具。
实验原理及步骤
RNA Pull-down:通过体外转录RNA并用生物素进行标记，然后与胞浆蛋白混合物共同孵育形成RNA蛋白质复合物，然后用链霉亲和素标记的磁珠分离纯化该复合物(利用生物素与链霉亲和素的非共价亲和作用)。洗脱后进行检测，如果检测蛋白为已知蛋白可通过WB进行鉴定，如果检测未知蛋白则可以结合质谱进行鉴定。流程为提取细胞胞浆蛋白样品液- -体外转录合成生物素标记RNA-共孵育_ -磁珠纯化- -洗脱得到互作蛋白. -WB或质谱鉴定。
DNA Pull-down:通过合成标记有生物素的DNA片段，与细胞核蛋白混合物共同孵育形成DNA-蛋白质复合物，然后用链霉亲和素磁珠纯化，WB或者质谱进行检测鉴定。流程为提取核蛋白样品液- -合成生物素标记DNA-共孵育- -磁珠纯化- ~洗脱
得到互作蛋白- -WB或质谱鉴定。
结果展示
RNA Pull-down
DNA Pull-down .
实验周期及交付标准
1.实验周期: 1-2个月
2.交付标准:
RNA Pull-down:探针序列、X光片.实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)
DNA Pull-down:探针序列、X光片.实验报告(实验步骤.试剂、仪器等)
需确认信息
1.目的基因种属及ID号
2.基因序列信息
3.样本种属及类型
4.样本数量.
5.分析要求
参考文献
[1]Chen R,Liu Y，Zhuang H，et al. Quantitative proteomics reveals that long non-coding RNA MAL AT1 interacts withDBC1 to regulate p53 acetylation[J]. Nucleic Acids Research, 2017, 45(17):9947-9959.
[2]Tran D H , Shishido Y，Chung S P , et al. lnentication of DNA-binding proteins that interact with the 5-f1anking region
of the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis and
mass spectrometry[J]. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 2015, 116:94-100.
部分实验代做服务
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