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细胞力学细胞体积测定系统
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细胞力学细胞体积测定系统,实时跟踪贴壁细胞的细胞体积,
细胞体积是细胞力学的一个关键参数,对理解细胞粘附相关过程和改进实验方法具有重要意义
Cell volume, ion pumps
有几种生理和病理学过程,其中细胞经历体积变化。 但是,没有可靠的方法可用于实时准确地测量贴壁细胞的体积。
细胞体积评估的好处
将细胞培养在光学透明的腔室中,该腔室可以准确地确定其随时间的体积,并可以并行跟踪负责体积变化的生化过程,例如激活离子泵。
例子
从相间期到Raji细胞有丝分裂的体积追踪[2]。
(A)将细胞放置在由FITC-Dextran补充的培养基中,其高度由立柱设定,其高度已校准到聚二甲基硅氧烷中。 底部图片:细胞在荧光图像上不显示荧光(比例尺为20 mm)。
(B)对应于(A)中虚线的荧光轮廓:荧光强度的大值和小值分别对应于腔室的大高度(背景)和零高度(支柱)。 右:这些值用于校准信号并计算细胞的光学厚度。
(C)后,通过积分整个细胞区域的总荧光强度获得细胞体积。
(A)HeLa细胞的体积轨迹。 在开始和结束时两个体积超调对应于有丝分裂的瞬时体积增加,di一个对应于母细胞,第二个对应于子细胞。
(B)(A)中具有FXm的细胞的原始荧光图像。 比例尺50毫米
[1] Zlotek-Zlotkiewicz, E. et al. (2015). Journal of Cell Biology, 211(4), 765–774.
[2] Cadart, C et al. (2017). Methods in Cell Biology, 139,103-120.
细胞被均匀地限制/压缩在两个亚微米分辨率的两个平行表面之间。不同的限制高度(例如1um – 300um),允许长期细胞培养和细胞增殖,同时保持对封闭的控制
与高分辨率光学显微镜系统兼容,可以处理足够多的细胞以进行完整的基因表达分析,可与生物功能化的微结构化底物和/或不同的基质(几何形状控制)结合使用
可以与凝胶结合(硬度控制),兼容任何细胞培养底物(培养皿至96孔板).
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