R22034-4×50 细胞色素氧化酶染色液（联苯胺法）
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详细信息
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)
产品货号：R22034
产品规格：4×50ml
产品简介：
细胞色素氧化酶(Cytochrome Oxidase，CO)被认为是线粒体膜固有的酶，在含有大量线粒体的细胞(如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞)内都具有高度活性。此酶活性往往作为细胞内氧化代谢的指标，亦作为线粒体的标志酶之一。
尚宝生物 细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)染色原理是细胞色素氧化酶催化3,3-二氨基联苯胺(DAB)使其侧链的氨基氧化，进行反复的氧化性聚合和氧化性环化形成不溶性的棕色Phenazine聚合物。此酶对固定剂敏感，故须用新鲜切片。
产品组成：
试剂名称 | 4×50ml | 保存条件 |
试剂(A): CO清除液 | 2×50ml | 4℃，避光 |
试剂(B): B1: DAB染色液 | 45ml | -20℃，避光 |
DAB孵育液 B2: DAB增强剂 | 5ml | 室温 |
B3: DAB反应液 | 100ul | 室温 |
按 B1:B2:B3=9000:1000:3混合，即为DAB孵育液，即配即用。 | ||
试剂(C): Lea苏木素染色液 | 50ml | 4℃，避光 |
试剂(D): CO对照液 | 1ml | 室温 |
自备材料：
恒温培养箱和光学显微镜。
操作步骤:
1. 冰冻切片，厚6μm，不固定。
2. 滴加CO清除液于切片上，铺满整个样品表面。
3. 切片入DAB孵育液中，37℃避光孵育45～60min。
4. 移去切片上的染色液，滴加CO清除液于切片上，铺满整个样品表面。
5. 蒸馏水稍洗3～5s。
6. (可选)滴加Lea苏木素染色液浅染细胞核3～5min。
7. 流水冲洗10min。常规脱蜡透明，中性树胶封固。
染色结果：
CO 酶活性部位 棕色
心肌、肾小管上皮内颗粒(线粒体) 蓝色
阴性对照(可选)：
取新鲜配制好的DAB孵育液，按DAB孵育液:CO对照液=50:1的比例混合，即为CO对照工作液。相同切片入CO对照工作液，室温孵育30～60min，其余同上，呈阴性反应。
注意事项：
1. 本染色液适用于冰冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。
2. CO孵育液孵育时间因组织而异，心肌、肾孵育约20～30min，肝脏约50～60min，甲状腺滤泡上皮约2h。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
