匈牙利Cellsorter Vavlecontrol单细胞挑选捕获系统介绍:
Cellsorter单细胞挑选捕获系统以显微镜为基础,采用毛细管技术从少量样本中分离单细胞或稀有细胞的自动细胞挑选系统,主要包括显微镜、控制器、电动载物台、3D自动显微操纵器、高清相机、注射泵、微量毛细管、控制软件和电脑。
该设备主要的应用领域:单细胞挑选、蛋白质工程、细胞黏附力分析、scRNA序列分析、循环肿瘤细胞分离、胎儿无创产前检测、血细胞干细胞分离等,相关的应用发表在Nature等期刊上。
该设备可以在一次运行中选择多个单细胞,已经过12年的测试和开发。高精准、高通量、全自动单细胞抓取捕获,吸取捕获细胞后自动放置到的PCR管或培养皿中,全过程软件控制。
Cellsorter的软件可根据用户预设的参数来棎测细胞/菌落具体参数,包括物理特征如大小、形状、细胞/菌落形态、与相邻细胞/菌落的相似程度,光谱特征如细胞/菌落的荧光强度等,捕获速度为1个细胞/秒,黏附力分析时每分钟约10个细胞。
可选择不同规格的微量毛细管,也可以定制。
主要特点:
直接从培养皿中进行高通量单细胞挑选
一个单细胞到达每个PCR管
一个循环可填充10条包含80个试管的PCR条
玻璃盖玻片,用于测试原位单细胞沉积
贴壁细胞的液滴体积小于1ul
收集约1毫升的悬浮细胞
每格15-20秒
分离表达荧光或发光标记的活贴壁细胞亚群
未标记和荧光细胞均可通过计算机视觉识别
分选后的活细胞
排序被荧光分子探针标记的细胞,以突出特定的细胞活性
收集单个细胞用于进一步培养,克隆,RNA或蛋白质制备
任何贴壁和非贴壁细胞类型均可分类
细胞培养需要少的准备才能进行分选
平均排序过程仅需几分钟
使用显微镜的荧光滤光片设置进行多通道检测
收集多个单元格时,排序速度为1个单元/秒。一次采集的细胞数:1-1000
Cellsorter单细胞挑选捕获系统包括荧光显微镜
蔡司AxioObserver倒置荧光显微镜
蔡司ECPlanNeofluar10xPh1物镜
先前流明200S光源
一套荧光滤光片
Marzhauser2D电动显微镜台和电动聚焦驱动
AndorZyla5.5摄像头
NE-1000注射泵
配备23英寸显示器的DELLPC
配件:
阀门控制细胞挑选系统和软件
硬铝制成的高精度微移液管固定控制台,配备LED照明,用于通过可旋转臂连接到电动微操作器的微移液管聚焦。
25mm行程1D电动微操作器
显微镜台上的特殊铝嵌件配件,带有用于35mm培养皿的孔和磁性固定环、用于10条PCR条纹的80个孔、用于测试和高分辨率成像的32x24mm2玻璃盖载玻片的孔以及带有校准十字线的孔。
CellSorter控制单元,带有2个高速流体阀和与计算机的USB连接
适用于MSWindows操作系统的用户友好直观控制软件
用于液体控制的附件、配件和管道
5支具有校准孔径的单细胞操作的硼硅酸盐微量移液管
电动蔡司AxioObserverA1倒置荧光显微镜
包括NA0.55LD聚光镜、ECPlanneofluar10x/0.3Ph1物镜
相位对比度和荧光成像配件
具有先前流明200S金属卤化物光源的荧光照明系统
Marzhauser2D电动显微镜台和电动聚焦驱动器
AndorZyla5.5照相机
USB3.0sCMOS–紧凑型微光成像摄像机
前照式科研级CMOS传感器
2560x2160像素阵列,6.5μm像素大小
1.2e-的低读取噪声,传感器稳定冷却至0°C,环境温度为+35°C
滚动快门和“真实”全局快门模式
12位和16位数字化
最大像素读出速率2x280MHz
iCam、C-mount、USB3.0接口(包括接口卡和电缆)、电源、触发电缆
NE-1000注射泵
可容纳1个注射器,最大容量为60毫升
输液速率从0.73µL/hr(1毫升注射器)到2100毫升/小时(60毫升注射器)
易于使用的键盘界面
节省空间的机箱:尺寸仅为53/4英寸x83/4英寸
包括NE-1000系列的所有高级功能和编程功能
配备23英寸Dell显示器的Dell台式计算机
处理器:IntelCorei7-47903,6:4核,8M缓存,高达4.00GHz
内存:8GBDDRRAM
硬盘驱动器:1000GB
SSD:120GB
文献举例:(以下论文题目为中文翻译)
单细胞分离和分类
1.Z.Környei等人:在计算机视觉控制的培养皿中进行细胞挑选NatureScientificReports3,文章编号:1088(2013)
2.R.Salánki等:亚微升液滴中的自动单细胞挑选和沉积
3.R.Salánki等人:基于高通量图像的单细胞分离,《显微镜与分析》,一月刊,S10-13(2015)
4.R.Ungai-Salánki等人:利用计算机视觉从悬浮液中自动分离单细胞,《科学报告》(ScientificReports)6,文章编号:20375(2016)
单细胞RNA测序
1.MiaPalmkvist:疟疾和恶性疟原虫在感染的红细胞表面的多肽,博士学位论文,斯德哥尔摩卡罗林斯卡研究所(2016)
2.A.Kozlov等人:对UNF目标的筛选确定了Rnb,这是果蝇昼夜节律的新型调节剂,《神经科学杂志》7,3286-16(2017)
3.M.Ngara等人:使用单细胞RNA-seq探索寄生虫异质性揭示了性阶段恶性疟原虫寄生虫之间的基因签名,实验细胞研究(2018)
4.PayamHaftbaradaranEsfahani等人:细胞形状决定基因表达:心肌细胞形态型转录组,心脏病学基础研究115(7)(2020)
循环肿瘤细胞(CTC)分离
1.玛妮·温特(MarnieWinter)等人:使用惯性微流控技术分离循环胎儿滋养细胞,进行无创产前检测,先进材料技术1800066(2018)
蛋白质工程
1.K.Piatkevich等。一种适用于荧光电压报告基因的机器人多维定向进化方法,NatureChemBiol,doi:10.1038/s41589-018-0004-9(2018)
单细胞粘附力
1.R.Salánki等。:e111450(2014):测定中使用计算机控制的微量,公共科学图书馆ONE9(10)单细胞粘附
2.P.K.Jani等人:补体MASP-1通过上调E-选择素表达来增强内皮细胞与中性粒细胞之间的粘附,《分子免疫学》75,38–47(2016)
3.N.Sándor等人:CD11c/CD18支配着人类单核细胞,巨噬细胞和树突状细胞在CD11b/CD18上的粘附力,《公共科学图书馆·人类杂志》11(9),e0163120(2016)
4.T.Gerecsei等人:功能化微珠的粘附力测量:计算机控制的微量移液器和流体力显微镜的深度比较,《胶体与界面科学学报》,555,245-53(2019)