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40740ES50 线粒体红色荧光探针
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生产厂家企业简介
翌圣生物科技(上海)股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动,聚焦生命科学产业链上游核心原料,从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业,通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径,成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业,产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验,构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来,公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种,涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂,能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂,广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力,不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日,公司已经获得授权18项(其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项)和45项与生物试剂相关的软件著作权,拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标,是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新,翌圣生物积极开展“产学研”合作,与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作,优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础,建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台,目前已经自主研发出20项核心技术,打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径,覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地,配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时,公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证,从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督,保证产品过程的可控制性及可追溯性,竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可,为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系,公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值,让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值,让世界更健康更快乐”的使命,专注于技术创新和产品升级,不断拓展核心技术的应用领域,为客户提供更为的产品与服务,助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时,翌圣生物将进一步推进国际化战略,继续布局和拓展海外市场,为全球生物试剂产业发展贡献力量。
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
MitoTracker® Red CM-H2XRos线粒体红色荧光探针 | 40740ES50 | 50 µg | 425.00 |
产品描述
MitoTracker® Red CM-H2XRos是一种细胞渗透型的dihydro-X-rosamine衍生物,包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。本品是一种还原型的红色荧光染料(Ex=579 nm,Em=599 nm),本身不发荧光。只需简单孵育细胞,即可被动运输穿过细胞膜,进入细胞后被氧化为发荧光且具线粒体选择性的探针,聚集在活性线粒体上。一旦线粒体被染色后,还能根据后续实验的需求进行固定(醛类固定剂如甲醛)和透化(醛类去污剂如Triton X-100),探针依然维持在细胞内。本品适合双标实验,因其红色荧光与其他的绿色荧光探针具有良好的分辨率。
虽然传统的线粒体荧光探针如TMR和罗丹明123,也能很容易的聚集在功能线粒体上,但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉,从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体能量状态影响因子的实验中,使其应用大受限制。
产品性质
CAS号(CAS NO.) | 167095-08-1 |
分子式(Molecular Formula) | C32H33ClN2O |
分子量(Molecular Weight) | 497.08 |
Ex/Em | 579/599 nm |
外观(Appearance) | 紫色固体 |
结构式(Structure) |
运输和保存方法
室温运输;-20℃避光干燥保存,有效期1年。
使用方法
1. 储存液的配制
本品是以粉末形式提供,使用前需将本品回温至室温。
之后使用细胞培养级别的无水DMSO(如Yeasen,货号:60313ES60)将其充分溶解至终浓度1 mM。
本品M. Wt.= 497.08 g/mol,换算下来,50 µg粉末只需加入100.6 µL DMSO即可得到1 mM储存液。根据单次的使用量将储存液分装后放到-20℃避光,避免反复冻融。特别注意:由于本品是还原型的化合物,对氧气相当敏感,特别是在溶液中,为了保持产品的稳定性,产品分装后充氮气或者氩气等惰性气体以防止在冻存的过程中被氧化。
2. 工作液的配制
根据不同的实验目的使用不同的探针浓度,以下的起始操作条件仅作参考,可根据细胞类型和其他的相关因素如细胞或组织的透化等进行适当调整。
用适当的缓冲液或细胞培养基稀释1 mM储存液至工作液浓度。一般推荐使用浓度为25-500 nM。对于后续需要做固定或透化的样本,推荐工作浓度为100-500 nM,为了降低过度加载导致的潜在伪影和线粒体毒性,在不影响实验结果的前提下应尽可能低浓度染色。另外,浓度过高也可能对其他细胞结构进行染色。
注意:1)本品MitoTracker® Red CM-H2XRos是还原型的荧光探针,使用的工作液浓度比氧化型(MitoTracker® Red CM-XRos)的浓度一般高3~5倍。以上推荐的浓度是针对氧化型MitoTracker® Red CM-XRos,请使用本品(还原型)时进行适当的浓度调整。2)血清中可能含氧化酶,影响本还原型探针的稳定性,因此,不建议使用含血清的*培养基稀释储存液。
3. 染色及检测
1)贴壁细胞的染色
培养皿/板内加入适量的培养基覆盖盖玻片进行爬片培养。当细胞长至所需丰度,吸除培养液,加入37℃预热的MitoTracker® Red CM-H2XRos染色工作液。在所使用细胞正常培养条件下孵育15-45 min(最佳孵育时间需优化)。染色结束后,使用新鲜培养液或缓冲液替换上述染色液,即可将其置于荧光显微镜下观察或荧光酶标仪下读数。或者进行后续的固定和透化步骤,见步骤4。
2)悬浮细胞的染色
离心收集细胞,吸除上清,利用37℃预热的MitoTracker® Red CM-H2XRos染色工作液轻轻重悬细胞。在所使用细胞正常培养条件下孵育15-45 min(最佳孵育时间需优化)。染色结束后,离心收集细胞,利用37℃预热的新鲜培养液或缓冲液重悬细胞,被染色的细胞可用流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光显微镜进行分析。
如果需要盖玻片上固定化的细胞,那么可在铺片前先用多聚赖氨酸(poly-D-lysine)包被载玻片或盖玻片。
或者进行后续的固定和透化步骤,见步骤4。
4. 固定和透化
1)染色结束后,利用培养液或缓冲液清洗细胞;
2)小心吸走清洗液。换用新鲜配制且预热的含2-4%甲醛的缓冲液或培养液进行细胞固定。经验证, 本染料MitoTracker® Red CM-H2XRos由含3.7%甲醛的*培养液于37℃孵育内皮细胞15 min能起到良好的固定效果。
3)清洗细胞:吸除固定液,用适当缓冲液冲洗细胞数次。
4)细胞透化(可选):
像ICC等实验需要细胞要做透化,则可将已固定的细胞直接加入含有去污剂如Triton X-100的缓冲液中孵育。透化结束后,用缓冲液清洗细胞即可进行后续ICC实验。经检测,利用含0.2% Triton X-100的PBS孵育内皮细胞10 min可以达到良好的透化效果。
另外,还可利用预冷的丙酮透化5 min,之后用PBS清洗细胞。经验证,即使后继没有进一步的抗体标记,丙酮透化处理也可降低背景信号。
注意事项
1)DMSO有毒,使用时请小心操作。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3)本产品仅作科研用途!
HB211230