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DLO-2-UV 乙醇酸氧化酶测试盒
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生产厂家莱贸生物科技(上海)有限公司,位于上海张江高科技术园区的创新型生命科学公司,自2012年成立以来,始终面向生命科学领域,从事科研机构及生产企业所需的各类试剂和试剂盒等,并提供代测服务及相关产品的技术支持和服务。公司具备快速高效研发、生产能力,汇集了大量生物工程行业的高尖人才,与国内科研院校联合开发新产品试剂盒,在生物技术行业拥有竞争力。莱贸生物自成立以来发展迅速,产品服务得到全国广大生产企业、高校、科研院所、医疗系统及相关同业的肯定,长期合作的客户遍及全国各地。公司拥有自营进出口权,为更好地服务广大用户,将Lifemall的质量管理提升到国际水平,我们竭尽所能!愿与广大生命科学工作者携手迎接属于生命科学的21世纪,共同创造新世纪的生物技术革命。
分光光度法 50 管/48 样
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代谢中的关键酶,也是光下合成草酸的关键酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。
测定原理
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙,在 324nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿。
试剂组成和配制
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 35mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存,临用前加 10mL 双蒸水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。酶液提取按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。12000g, 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
酶活性计算公式
1.按照蛋白浓度计算
酶活性定义:
每毫克蛋白每分钟氧化 1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。GOX 活性(nmol/min /mg prot)= dA×∆ε×V 反总÷(V 样×Cpr)÷T= 392×△A÷Cpr乙醇酸氧化酶测试盒