19810ES03 伴刀豆球蛋白A磁珠
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
详细信息
伴刀豆球蛋白A磁珠是表面共价偶联了伴刀豆球蛋白 A（ConA）的超顺磁性聚合物微球，具有单分散和磁反应性强等特点。ConA磁珠在Ca2+和Mg2+存在的情况下，通过伴刀豆球蛋白 A与末端α-D-甘露糖基和α-D-葡萄糖基的亲和作用，快速高效地分离纯化多糖、糖蛋白和糖脂等生物分子，而且使用ConA磁珠分离或固定细胞非常便捷，并在后续清洗过程中大程度减少细胞丢失，也可以用于收集和固定细胞核，也可以直接用于CUT & Run和CUT & Tag（ChIP-seq实验的革新性技术）等实验。
产品性质
基质 | 磁性聚合物微球 |
配体 | 伴刀豆球蛋白 A（Con A） |
载量 | 105个细胞/μL磁珠 |
粒径 | 1 μm |
磁珠浓度 | 10 mg/mL |
应用 | 分离细胞/细胞核，纯化糖蛋白，Cut-Run, Cut-Tag |
储存缓冲液 | PBS (pH7.4), 0.01% Tween-20, 0.05% Proclin-300 |
储存条件
2~8℃保存，有效期2年。
使用说明
以捕获细胞和纯化糖蛋白为例，用于Cut-Tag具体操作见12598ES试剂盒。
缓冲液配置
1）自备试剂
试剂名称 | 组分 |
结合液 | 20 mM HEPES (pH7.5), 10 mM KCl, 1 mM CaCl2, 1 mM MnCl2 |
清洗液 | 20 mM HEPES (pH7.5), 150 mM NaCl, 0.5 mM Spermidine, 1×Protease inhibitors cocktail |
洗脱液 | 5mM Tris (pH8.0), 150 mM NaCl, 1M Glucose |
2）自备设备和耗材：磁性分离架，旋转混合仪，PCR管，微量移液器及吸头（RNase-free）。
3）将磁珠恢复至室温，且均匀重悬。
样品准备（以哺乳动物细胞为例）
1）准备哺乳动物细胞(1.0×104~1.0×105个)，离心收集(4℃，600×g，3~5min)，小心吸弃上清；
2）加入 140 μL 结合缓冲液 ，充分混匀重悬细胞，离心收集(4℃，600×g，3~5min)，小心吸弃上清；
3）加入 90 μL 结合缓冲液，充分混匀重悬细胞。
【注】：贴壁较紧的细胞可使用 等部分消化获得，对于动物组织、植物或真菌细胞可通过特殊处理获得分散的细胞或原生质体进行实验。
磁珠准备
1）吸取10 μL均匀重悬的 Con A磁珠，加入40 μL 磁珠结合液，吹吸混合，磁吸弃上清。
2）加入10 μL 磁珠结合液，吹吸混合。
细胞捕获
1）将重悬在结合液中的ConA磁珠（步骤3）轻轻滴加在细胞悬液（步骤2）中，颠倒5次混匀后，置于旋转仪上混匀，室温孵育30 min 或者4 ℃过夜。
2）离心管在磁力架上放置1 min，吸弃上清。
3）取500ul清洗液加入磁珠中，用移液器轻柔吹打，重悬磁珠，再置于磁力架1 min，吸弃上清。
4）重复步骤3）洗涤3-4次。
洗脱
1）糖蛋白的洗脱：加入50~250 μL洗脱液，置于翻转混合仪上室温孵育10~30 min，接着在磁力架上静置 1 min，收集上清得到糖蛋白，可用于SDS-PAGE电泳或Western检测
【注】：也可使用PNGase F酶切除糖基进行洗脱。
2）细胞的洗脱：磁珠粒径小，对细胞的生长和活性影响较小，也可以选择不洗脱。
注意事项
1. 磁珠应避冷冻，否则可能会导致磁珠碎裂，性能下降。
2. 磁珠取用前应恢复至室温，且充分混匀；但不要剧烈震荡，否则容易产生气泡。
3. 建议样本细胞活性不低于80% (细胞活性可以用台盼蓝染色来鉴定)。
4. ConA在Ca2+和Mn2+离子存在时才有活性，实验中应用的溶液不能含有EDTA等螯合剂，否则会导致结合效率降低。
5. 水平旋转时定时轻弹底部混匀，细胞量较多时易聚集干结。
6. 枪头吸吹时要缓慢，避免产生过多气泡；避免用10 μL小枪头吹吸细胞；
7. 吸除管内液体时，枪头远离磁珠一端，避免枪头粘连带出磁珠。
8. 针对特定细胞类型和细胞量，可能需要增减磁珠用量以达到优效果。
9. 本产品仅作科研用途！
10. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
