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abs60317 核酸共转染试剂
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生产厂家爱必信(上海)生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及耗材的高新技术企业。公司秉承“为生命科学创造便利!为客户创造价值!为员工创造幸福人生!”的发展理念,拥有专业的产品研发质检团队、市场营销团队及*仓储物流等管理团队。荣获2021年度上海市“专精特新”企业称号。
自营品牌Absin®,主要经营产品有:生化试剂(常用生化试剂、生物学实验常用试剂、荧光染料、激动剂/抑制剂,植物提取物)、细胞生物学(细胞培养产品、血清、基质胶、添加剂、检测试剂盒)、免疫学产品、分子生物学产品、实验室仪器/耗材、产品定制和检测服务。
Absin还提供一些特色产品:霍乱毒素B亚单位(CTB)、 鸡胚提取物(CEE)、 牛脑垂体提取物、 呼吸爆发试剂盒、 多色免疫组化试剂盒、 mRNA原料等在业界深受客户喜欢。
Absin秉承踏实,务实,求精和不断创新的精神为中国科学家提供优质产品,努力打造属于中国自己的生物试剂品牌,为广大科学家提供更全面更丰富更优质的产品。
爱科研,必信它(Absin)!Absin努力成为你身边的科研百宝箱!
产品介绍:
核酸共转染试剂盒是我们研发的专门用于将质粒 DNA、siRNA 或 mimics 共同转染于同一细胞的试剂盒。它具有非常好的转染性能,可将质粒 DNA 和 siRNA 高效地共转染于绝大多数贴壁细胞和原代细胞。在贴壁细胞中,质粒 DNA 转染效率可高达 90%以上,siRNA 在质粒转染阳性细胞中共转染效率可高达 95%以上。其功能强大,不仅可高效转染质粒 DNA 和 siRNA,还可高效转染 mRNA、mimics、反义核酸和各种小分子 DNA。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,我们的共转染试剂 采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后 24 小时细胞死亡率不到 10%。使用也非常方便,先将转染试剂与质粒 DNA 和 siRNA 混合,再将该转染复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。
产品特点:
1、强大的质粒DNA与siRNA共转染性能,可高效转染多种贴壁细胞和原代细胞,质粒DNA转染效率在贴壁细胞中可高达90%以上,siRNA在质粒转染阳性细胞中共转染效率高达95%以上;
2、共转染功能强大,不仅可将质粒DNA与siRNA共转染于同一细胞,还可共转染mRNA、mimics、反义核酸于同一细胞;
3、极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响。
操作步骤(以 24 孔板转染为例):
A、 细胞接种:
1、转染前一天对细胞进行转接,每孔接种1.5×105个细胞,使转染时细胞密度为80-90%,且生长良好(非常重要);
2、 最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。
B、试剂A转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):
1、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,再加入适量的转染试剂,见附表。用移液器轻轻混匀,室温静置5分钟。
2、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,再加入适量的DNA,轻轻混匀,之后再加入适量的siRNA,见附表。用移液器再次轻轻 混匀,室温静置5分钟。
3、将DNA-siRNA-培养基混合物滴加至试剂A-培养基混合物中,用移液器轻轻混匀,室温静置15~20分钟,立即转染。注意:试剂A-培养基混合物和DNA-siRNA-培养基混合物的混合次序非常重要,切勿颠倒。注意:离心管最好使用聚丙烯离心管。
C、转染:
1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。
2、 培养24-48小时后观察或进行下一步实验。
3、试剂A在培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。
附表 1:不同培养体系推荐初始转染条件
培养皿 | 96 孔板 | 48 孔板 | 24 孔板 | 12 孔板 | 6 孔板 | 10cm 皿 | |
培养基、试剂、核酸量 | 无血清培养基(μl) | 2x10 | 2x25 | 2x50 | 2x100 | 2x200 | 2x1000 |
试剂A (μl) | 0.5 | 1.3 | 2.5 | 5 | 10 | 50 | |
1μg/μl plasmid (μl) | 0.16 | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 | 16 | |
siRNA (pmol) | 3 | 8 | 15 | 30 | 60 | 300 | |
培养基(ml) | 0.1 | 0.25 | 0.5 | 1 | 2 | 10 |
储存/保存方法:
-20°C 保存,有效期一年,使用前请轻轻混匀。
注意事项:
1、刚开始转染,请务必进行优化实验,如24孔板质粒转染,每孔质粒用量0.8ug,siRNA用量15pmol,试剂A可选择2.0ul、2.5ul、3.0ul进行优化。或者,每孔质粒用量0.8ug,试剂A用量2.5ul,siRNA用量选择10pmol、15pmol、20pmol、25pmol进行优化。
2、在制备DNA-siRNA转染复合物时,应避免体系中存在血清,因血清会干扰试剂A与DNA、siRNA形成复合物。培养体系中尽量不要添加抗生素,抗生素会导致培养细胞死亡。
**温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
CAS | - |
纯度 | - |
分子量 | - |
分子式 | - |
供货周期 | 现货 |
规格 | 0.5ml;1.0ml;1.5ml |
货号 | abs60317 |
应用领域 | 生物产业 |
主要用途 | 专门用于将质粒 DNA、siRNA 或 mimics 共同转染于同一细胞的试剂盒 |