产品描述：

Lipofect5000是在研究了国外同类产品性能的基础上开发的一款高性能通用型核酸转染试剂，适用于将质粒DNA转染入哺乳动物细胞。Lipofect5000具有非常优异的转染性能，可转染绝大多数贴壁细胞和部分悬浮细胞。在贴壁培养的AAV293细胞中，Lipofect5000质粒DNA（EGFP质粒）的转染阳性率可高达90%以上，即使对于较难转染的RAW264.7细胞，Lipofect5000的质粒转染阳性率也可高达70%。与部分国际品牌相比，Lipofect5000拥有更高的DNA转染性能，价格也亲和，是进行DNA转染实验的理想选择。

产品特点：
1、可高效转染多种贴壁细胞和部分悬浮细胞等，在贴壁细胞中的转染阳性率可高达90%以上。
2、 显著的性价比优势，转染性能显著优于部分国际品牌而价格不足其30%。

产品组分：

应用：

适用细胞系：HeLa,Huh-7，CCD-14Br，SBC-1,A-172，NB-1,COS-7,293T,人肝细胞，原代大鼠肝细胞，鸡胚胎心肌细胞等。

贴壁细胞转染方法步骤（以24孔板转染质粒DNA为例）:

A、细胞接种：
1、 转染前一天将细胞铺板（使用不含抗生素的培养基），每孔1.5-2.0×105个细胞左右，使转染时细胞密度为80%；
2、最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基，以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。

B、Lipofect5000/DNA复合物包装（该步完成后应立即进行转染）：
 1、在1.5ml无菌离心管中加入50ul Trans buffer，并添加适量的DNA（参见附表），用移液器轻轻混匀成DNA稀释液。
2、使用前混匀转染试剂，立即往DNA稀释液中添加适量的转染试剂，用移液器轻轻混匀。
3、将Lipofect5000/DNA混合物室温静置15分钟后，立即转染。
注意：离心管最好使用聚丙烯离心管。

C、转染：
1、将步骤B制备的复合物滴加至细胞培养孔中。轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。
2、 培养24小时后即可观察，但最佳观察时间为36小时。如果需要，细胞培养6-24小时后可以更换新鲜培养基，但不是必须。
3、 收获细胞，进行后续实验。对于稳定转染，在转染24-48小时后，用选择培养基传代培养。

储存/保存方法：

4-8°C 保存，有效期一年，使用前请轻轻混匀。

技术指标：

附 贴壁细胞培养体系推荐初始转染条件：

注意事项：

1、刚开始使用，建议进行细胞密度优化实验，如可在培养板中分别接种1.5×105、2.0×105、2.5×105个细胞，分别进行DNA转染，以选择出转染效果较好的细胞接种密度。
2、应避免转染复合物中存在血清，因为血清会干扰转试剂与DNA形成复合物，在转染过程中不要向培养基中添加抗生素。

温馨提示：本产品仅作科研实验使用，不支持临床等研究