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abs60259 核酸转染试剂盒
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生产厂家爱必信(上海)生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及耗材的高新技术企业。公司秉承“为生命科学创造便利!为客户创造价值!为员工创造幸福人生!”的发展理念,拥有专业的产品研发质检团队、市场营销团队及*仓储物流等管理团队。荣获2021年度上海市“专精特新”企业称号。
自营品牌Absin®,主要经营产品有:生化试剂(常用生化试剂、生物学实验常用试剂、荧光染料、激动剂/抑制剂,植物提取物)、细胞生物学(细胞培养产品、血清、基质胶、添加剂、检测试剂盒)、免疫学产品、分子生物学产品、实验室仪器/耗材、产品定制和检测服务。
Absin还提供一些特色产品:霍乱毒素B亚单位(CTB)、 鸡胚提取物(CEE)、 牛脑垂体提取物、 呼吸爆发试剂盒、 多色免疫组化试剂盒、 mRNA原料等在业界深受客户喜欢。
Absin秉承踏实,务实,求精和不断创新的精神为中国科学家提供优质产品,努力打造属于中国自己的生物试剂品牌,为广大科学家提供更全面更丰富更优质的产品。
爱科研,必信它(Absin)!Absin努力成为你身边的科研百宝箱!
产品介绍:
该产品是我司在Plasmid Transfection Reagent的基础上进一步研发成功的专门用于核酸高效转染的试剂盒。它具有非常好的转染性能,可高效转染绝大多数贴壁细胞,转染效率可高达90%以上(Hela细胞,EGFP质粒)。其功能强大,不仅可高效转染较大分子的质粒DNA,还可高效转染mRNA、siRNA、mimics和各种小分子DNA。
与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,该试剂盒采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后24小时细胞几乎无明显死亡。它使用也非常方便,先将转染试剂与质粒DNA混合,再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。它适合于贴壁细胞的核酸转染,如需转染原代细胞,请选择原代细胞核酸转染试剂盒(abs60324)。如需转染悬浮细胞,请选择悬浮细胞核酸转染试剂盒(abs60325)。
产品特点:
1、强大的细胞转染性能:可高效转染多种贴壁细胞,转染效率在贴壁细胞中可高达90%以上;
2、转染功能强大,不仅可高效转染大分子质粒DNA,还可高效转染mRNA、siRNA、mimics和各种小分子DNA;
3、极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响;
4、操作简便,可用于含血清培养基培养细胞的转染,转染前后不需要更换培养液。
试剂盒包装:
货 号 | 试剂A | 试剂B |
abs60259-0.5ml | 0.4 ml | 0.5 ml |
abs60259-1.0ml | 0.8 ml | 1.0 ml |
abs60259-1.5ml | 1.2 ml | 1.5 ml |
转染效率:可高效转染多种贴壁细胞,转染效率在贴壁细胞中可高达90%以上;
细胞死亡率:死亡率不到10%
操作步骤:
一、质粒DNA转染(以24孔板转染为例):
A、细胞接种:
1、转染前一天对细胞进行转接,每孔接种0.8-1.2×105个细胞,使转染时细胞密度为90%左右,且生长良好(非常重要);
2、最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。
B、试剂B /DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):
1、在1.5 ml无菌离心管中加入50 ul无血清培养基,再加入适量的转染试剂,见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2、在1.5 ml无菌离心管中加入50 ul无血清培养基,并加入适量的试剂A,轻轻混匀,再加入适量的DNA,见附表。用移液器再次轻轻混匀后在室温静置5分钟。
3、 将DNA-培养基混合物滴加至试剂B-培养基混合物中,用移液器轻轻混匀后在室温静置15-20分钟后,立即转染。注意: 试剂B-培养基混合物和DNA-培养基混合物的混合次序非常重要,切勿颠倒。
注意:离心管最好使用聚丙烯离心管。
C、转染:
1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。
2、培养12小时后即可观察,最佳观察或收获时间为24-48小时。
3、试剂B在培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。
二、siRNA转染(以24孔板转染为例):
A、 细胞接种:
1、转染前一天对细胞进行转接,使转染时细胞密度为30-50%左右,且生长良好、无支原体污染(非常重要);
2、 最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。
B、试剂B /siRNA转染复合物制备 (该步完成后应立即转染):
1、 在1.5 ml无菌离心管中加入50 ul无血清培养基,并添加适量的转染试剂(见下表) 。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2、 在1.5 ml无菌离心管中加入50 ul无血清培养基,并添加适量的siRNA(见下表),用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
3、将siRNA-培养基混合物滴加至试剂B-培养基混合物中,用移液器轻轻混匀后在室温静置15-20分钟后,立即转染。
C、转染:
1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。
2、37°C培养24-72小时,检测基因抑制效果。如果需要,细胞培养4-6小时可以更换培养基,但不是必须。
3、 试剂B 在培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。
储存/保存方法:
-20°C 保存,使用前请轻轻混匀;有效期1年。
技术指标:
附表 1:质粒转染不同培养体系推荐初始转染条件
培养皿 | 96 孔板 | 48 孔板 | 24 孔板 | 12 孔板 | 6 孔板 | 10cm 皿 | |
培养基、试剂、DNA量 | 无血清培养基(ul) | 2x10 | 2x25 | 2x50 | 2x100 | 2x200 | 2x1000 |
试剂A (ul) | 0.4 | 1.0 | 2.0 | 4.0 | 8.0 | 40 | |
试剂B (ul) | 0.5 | 1.3 | 2.5 | 5.0 | 10 | 50 | |
1 ug/ul plasmid (ul) | 0.16 | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 | 16 | |
培养基(ml) | 0.10 | 0.25 | 0.50 | 1.0 | 2.0 | 10 |
附表 2:siRNA 转染不同培养体系推荐初始转染条件
培养皿 | 96 孔板 | 48 孔板 | 24 孔板 | 12 孔板 | 6 孔板 | 10cm 皿 | |
培养基、试剂、DNA量 | 无血清培养基(ul) | 2x10 | 2x25 | 2x50 | 2x100 | 2x200 | 2x1000 |
试剂B(ul) | 0.4 | 1.0 | 2.0 | 4.0 | 8.0 | 40 | |
siRNA (pmol) | 4 | 10 | 20 | 40 | 80 | 400 | |
培养基(ml) | 0.10 | 0.25 | 0.50 | 1.0 | 2.0 | 10 |
产品用途:
可高效转染绝大多数贴壁细胞,转染效率可高达90%以上(Hela细胞,EGFP质粒)。试剂A功能强大,不仅可高效转染较大分子的质粒DNA,还可高效转染mRNA、siRNA、mimics和各种小分子DNA。
注意事项:
1、刚开始转染,请务必进行优化实验,如24孔板质粒转染,每孔质粒用量0.8 ug, 试剂B 可选择2.0 ul、2.5 ul、3.0 ul、3.5 ul进行优化。24孔板siRNA转染,试剂B 用量2.0 ul,siRNA用量可选10 pmol、20 pmol、30 pmol、40 pmol进行优化。
2、 在制备DNA或siRNA转染复合物时,应避免体系中存在血清,因血清会干扰试剂B 与DNA或siRNA形成复合物。培养体系中尽量不要添加抗生素,抗生素会导致培养细胞死亡。
3、试剂A仅用于质粒转染,RNA或siRNA转染不需加入试剂A。
4、 请注意质粒转染和siRNA转染时对细胞密度和转染试剂用量等条件的差异,不要混用同一条件。
5、如果需要质粒稳转,请在转染24-48小时后加入筛选培养基。
6、 本产品适合于质粒DNA、siRNA分别独立转染,如需质粒DNA、siRNA共转,请选用核酸共转染试剂盒。
本产品仅用于科学研究,不得用于医学临床用途。
*温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究
CAS | - |
纯度 | - |
分子量 | - |
分子式 | - |
供货周期 | 现货 |
规格 | 0.5ml;1.0ml;1.5ml |
货号 | abs60259 |
应用领域 | 生物产业 |
主要用途 | 专门用于核酸高效转染的试剂盒 |