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RevIT™ AAV Enhancer提高AAV产量的利器
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代理商北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下简称西美杰)于2006年成立,由留美归国生物领域专业人士创办。西美杰坚持自己的经营理念,勤奋踏实地整合全球产品资源与技术资源,为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式产品服务方案,帮助科研及企业单位缩短科研时间、节约科研成本、提升科研水平、增强企业市场竞争力。
西美杰以其开放、进取、诚信、专业等优势与国外多家试剂、原料和技术供应商建立了长期稳定的合作伙伴关系,成为了众多国际厂商的中国区总代理、一级代理和中国授权代表处。更与药用辅料生产商长期战略性合作,共同开展制药辅料的进口注册与市场开拓。
业务的迅猛发展促进了西美杰内部组织架构的不断优化,针对科研客户与企业客户的不同需求,西美杰建立了科研与工业两支独立的营销团队,分别配备专业的技术支持和客服人员,力求为不同类型的客户提供前沿专业的解决方案以及产品与高效的服务。
经过十多年的发展,西美杰得到了众多客户的支持与信赖,在业务上实现了迅猛发展,以专业的服务成为多家跨国企业中国区研发与生产基地、制药企业与诊断企业以及中科院系统、军科院系统、医科院系统、清华大学、北京大学、北大医学部、首都医科大学等高校与科研院所采购平台的供货商。
一、西美杰主营产品线与代理品牌
1. 免疫学:二抗和底物生产商KPL的中国代理;抗体生产商Lifespan,Abnova,Cali-Bio,Mybiosource等近10个品牌的中国一级代理。
2. 分子与细胞生物学:德国生化试剂Panreac-AppliChem、德国核苷酸原料品牌Jena Bioscience等中国总代理;氧化应激检测Cell Biolabs、转染试剂专家 Mirus、动物免注射给药工具Alzet等中国总代理或一级代理。
3. 植物学:美国组培试剂品牌Phytotech中国总代理;植物抗体生产商Agrisera、组培抗菌剂产品PPM供应商PCT中国一级代理。
4. 蛋白结构学:特色蛋白结晶试剂与耗材Jena Bioscience、Hampton、Anatrace、MiTeGen。
5. 生物制药:覆盖制药从上游到下游环节,全球药用辅料供应商Pfanstiehl(全球重磅生物药中7个药物的辅料供应商)、细胞营养添加物KERRY、欧洲制药生化原料供应商Panreac-AppliChem,以及HCP/Prot A/BSA残留检测试剂盒生产商Cygnus等中国制药领域代理。
6. 诊断原料:二抗和底物生产商KPL以及自身免疫抗原抗体生产商Arotec中国总代理。
二、西美杰主营产品领域与服务
1. 科研/研发产品及服务项目
研究领域上:覆盖生物化学、细胞生物学、免疫学、蛋白组学、植物学、分子生物学、药物筛选;
研究对象上:覆盖人类、动物与模式动物、植物等物种;
产品结构上:从基因到蛋白质结构与in vivo/in vitro功能的分析和研究;
产品种类上:从试剂到特殊工具和耗材。
2. 生物工业生产原料、药用辅料
覆盖培养基生产、生物制药/疫苗生产细胞营养、无抗生素筛选原核表达系统、HCP/Prot A/BSA残留检测试剂盒、检测抗原/抗体/底物/BSA、诊断工业原料。
3. 技术服务、合约开发与技术转让
稳定表达CHO细胞株的构建与工艺开发;
培养基优化;
多肽合成、抗体定制、病毒包装等;
药物功能筛选服务KinaseProfiler™等。
4. 代理进口服务
西美杰拥有自主进出口资质,和自有国际物流运输系统,为中国众多大型科研机构提供免税科研仪器和试剂的代理进口服务,我们乐意为客户代理进口在中国没有销售代理的产品。
西美杰将继续秉承诚信、专业经营之风,整合全球优势产品资源、技术资源和我公司的服务资源,为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式的服务。
腺相关病毒 (AAV) 是基因治疗中使用广泛的传递机制。近年来,基于AAV病毒开发的基因疗法的研发及临床试验注册项目数量呈指数级增长,截至目前,美国FDA已批准五项AAV疗法,同时,用于基因治疗的AAV也是全球市场上最为昂贵的药物之一,其中售价最高的Hemgenix®,每剂价格约为350万美元。由于该疗法每剂量可能需要1011-1016载量的AAV病毒,如何实现高效的AAV生产,已成为工艺流程优化中的重要一环。
西美杰代理的Mirus成立于1996年,在核酸递送领域深耕多年,TransIT-VirusGEN® GMP 转染试剂支持AAV及慢病毒(LV)从科研到GMP商业级别生产。不同于传统基于单组分的转染试剂(如阳离子聚合物聚乙烯亚胺,PEI),Mirus将多聚物及脂质技术进行多重组合,针对不同细胞类型,不同应用场景,有着不同转染方案。
Mirus递转平台Polymers + Lipids的多重、多功能组合
RevIT™ AAV Enhancer提高AAV产量的利器
在病毒生产工艺方面,除了需要克服细胞递转过程中的多重阻碍,以实现更高效转染和更低细胞毒性;增强子的加入,还可大幅度提升多种血清型AAV病毒生产载量。但Mirus并没有止步于此,为了进一步提高下游生产中的AAV产量, 今年七月底西美杰代理的Mirus发布用于AAV生产的RevIT™ AAV Enhancer,可搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 转染试剂或其他品牌转染试剂 (如PEI等)。基于HEK293悬浮细胞数据,相对于老版本AAV增强子,RevIT™ AAV Enhancer可将AAV基因组滴度提高1.2-4.9倍,并且使用更便捷,非常容易整合入现有的AAV生产工艺流程中。Mirus RevIT™ AAV Enhancer的推出,使得AAV上游生产成本进一步降低成为可能,进而降低基因治疗药物单剂量成本。
RevIT™ AAV Enhancer
RevIT™ AAV Enhancer:可以将AAV基因组滴度提升1.2-4.9倍
实验结果显示,平行对比Mirus TransIT-VirusGEN®搭配老版本AAV增强子(VirusGen + Enh 1.0)和新版本RevIT™ AAV Enhancer (VirusGen + RevIT),针对AAV2、AAV8、AAV9不同血清型,基因组滴度分别有着1.6、4.9以及1.2倍提升。除此之外,在测试的所有血清型中,使用RevIT™ AAV Enhancer也在不同程度上收获了更高比例的实心率 (图1)。该结果表明,在搭配Mirus TransIT-VirusGEN®转染试剂时,新版本增强剂RevIT™ AAV Enhancer可显著提高AAV基因组滴度(GC/mL)及实心率(%Full Capsids)。
图1 . 相比Mirus老版本增强子,加入RevIT™ AAV Enhancer后,可将AAV基因组拷贝数提升1.2-4.9倍,同时改善AAV病毒实心率。
RevIT™ AAV Enhancer具有广泛适配性,搭配其他品牌转染试剂(如PEI),AAV病毒基因组滴度有着显著提升
平行测试两个品牌转染试剂:Polyplus FectoVIR®转染试剂(“Polymer F”)以及Polyplus PEIpro®转染试剂(“Polymer P”),在加入Mirus RevIT™ AAV Enhancer,针对不同血清型AAV2、AAV8、AAV9,AAV基因组滴度分别有着1.7-2.0x、1.7-2.2x、2.2-2.3x提升(图2)。实验结果表明,在搭配其他品牌病毒转染试剂时,Mirus RevIT™ AAV Enhancer也可显著提高AAV病毒基因组滴度(GC/mL)。
图2. “Polymer F”以及“Polymer P”病毒转染试剂搭配Mirus RevIT™ AAV Enhancer,针对不同血清型AAV,其病毒基因组滴度都有着显著提升。
RevIT™ AAV Enhancer具有广泛的适配性,可适用于不同培养基体系
Mirus TransIT-VirusGEN®转染试剂搭配RevIT™ AAV Enhancer,在不同品牌的病毒生产培养基中,具有很好的兼容性。测试使用293-VP 2.0细胞,搭配培养基类型包括VPM (Thermo Fisher) 及 BalanCD HEK 293 (Irvine Scientific)。实验结果表明,针对不同血清型AAV2、AAV5、AAV8、AAV9,RevIT™ AAV Enhancer在不同培养基实验条件下,AAV病毒基因组滴度提升方面并无显著差异(图3)。
图3. 更换不同品牌病毒生产培养基,AAV病毒基因组滴度的增加无显著差异。
RevIT™ AAV Enhancer实验流程更灵活,在转染的不同时间窗口加入有着近似表现
为了进一步确认加入RevIT™ AAV Enhancer来提高AAV产量是否需要严格把控加入时间,平行测试了不同加入的时间点,包括转染前30min或60min、转染时及转染后。实验结果显示,相比于对照组,在不同时间点加入RevIT™ AAV Enhancer, AAV8病毒基因组滴度均有稳步的提升(2倍),并且病毒实心率也稳定保持在相同水平(图4)。该实验结果表明,RevIT™ AAV Enhancer加入时间点的灵活性,一定程度上简化了生产工作流。
图4. RevIT™ AAV Enhancer在转染的不同时间窗口加入有着近似表现
RevIT™ AAV Enhancer提高AAV产量的利器
实验tips:如何进行病毒转染试剂评估?什么是病毒载量?如何检测?
更多详细信息,请查看Technical Resources中Virus Titer Reference Card ,更加详细地介绍了检测和计算病毒滴度的详细方法。
相关产品信息及链接
产品名称 | 规格 | 货号 | 链接 |
RevIT™ AAV Enhancer | 1.5 ml | MIR 8000 | link |
10 x 1.5 ml | MIR 8006 | ||
VirusGEN® AAV转染试剂及RevIT™ AAV Enhancer | For 1L of Culture | MIR 8007 | |
For 10L of Culture | MIR 8008 | ||
TransIT-VirusGEN®转染试剂 | 0.3 ml | MIR 6703 | link |
0.75 ml | MIR 6704 | ||
1.5 ml | MIR 6700 | ||
5 x 1.5 ml | MIR 6705 | ||
10 x 1.5 ml | MIR 6706 | ||
30 ml | MIR 6720 | ||
TransIT-VirusGEN® GMP级别转染试剂 | 150 ml | MIR 6845-GMP | link |
VirusGEN® AAV转染试剂(套装) | 1 kit for 1 L of cell culture | MIR 6750 | link |
VirusGEN® GMP级别AAV转染试剂(套装) | 1 Kit - for 50 L of cell culture | MIR 6815-GMP | link |
VirusGEN® LV转染试剂(套装) | 1 kit for 1 L of cell culture | MIR 6760 | link |
VirusGEN® GMP级别LV转染试剂(套装) | 1 Kit - for 50 L of cell culture | MIR 6825-GMP | link |
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Mirus产品年鉴
西美杰代理的美国Mirus公司成立于1995年,是世界上很早开发高效、低毒转染试剂的公司,同时也是该类试剂的主要供应商之一。其产品线涵盖化学转染试剂、电转染产品、病毒生产和转导产品,适用于基因功能研究、蛋白生产、病毒载体生产和动物模型构建等领域。Mirus许多杰出成果获得广大用户的好评。
北京西美杰科技有限公司是Mirus中国区代理,始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务,Mirus热销转染产品常备现货。西美杰是Applichem代理,KERRY代理,Pfanstiehl代理,Cygnus代理,c-LEcta DENARASE®代理,SeraCare (KPL)代理,Lifespan(LSBio)代理,Phytotech代理,Agrisera代理,Cali-Bio代理,Jena Bioscience代理,Immundiagnostik代理,Advanced BioMatrix代理,Mirus代理,Alzet代理Genetics代理,Cell Biolabs代理,MYOCEA代理,Gropep代理,MyBioSource代理,Hampton代理,LeeBio代理,Cal Bioreagents代理,Everest Biotech代理,Nordic-Mubio(SCICONS)代理,Exalpha代理,SCIGEN代理,MiTeGen代理,Prospec代理,欢迎大家咨询订购。