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AX-S022 细胞划痕
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实验概念
细胞划痕实验是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造,细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。
细胞板画线→接种细胞→用枪头制造划痕→培养适当时间进行拍照
注意事项
1.流式检测样本 | |||
样本形式 | 处理方式 | ||
血样 | 当天采集的血液,置于抗凝管中,建议血量≥2mL,单个血样对应分组较多时应适当加大采血量 | 4小时之内完成淋巴细胞分离 | |
组织 | 新鲜标本离体后置于PBS中,4℃保存运输。离体时间不可超过24小时。 | ||
细胞 | 武汉本地客户可以将培养细胞的孔板交予销售带至实验室,需要用封口膜密封,防止漏液。外地客户需将有活力的细胞置于培养瓶中常温快递至公司检测 | ||
注意事项: | |||
2.其他检测 | |||
检测形式 | 处理方式 | 保存 | 运输 |
流式细胞周期检测 | 将细胞正常消化后,冷PBS悬浮细胞,之后缓慢加入4℃预冷无水乙醇固定,乙醇终浓度75% | -20℃ | 冰袋 |
流式细胞凋亡检测 | 将细胞正常消化后,PBS洗一遍,PBS重悬 | 必须当天送样 | 冰袋 |
Tunel细胞凋亡检测 | 有活力的细胞,弃去培养液,PBS冲洗后,加入足量4%多聚甲醛,培养板附上保鲜膜,盖上板盖,胶布缠裹固定,避免固定液体流出 | 4℃ | 冰袋 |
原代分离实验 | 无菌采取完整的组织块,新鲜组织离体后置于无菌培养基中 | 离体时间不可超过4小时 | 冰袋 |
血小板的分离 | 需要选择Medical vacuum blood vessel collection获得抗凝血,全过程样本均需在20±2℃的条件下进行。为获得实验结果,在取血2h内进行实验,血液存放时间越长,细胞分离效果越差。血液放置超过6h后分离效果更差甚至不能达到分离目的。 | 4℃ | 冰袋 |