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蛋白质总巯基检测试剂盒
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蛋白提取，细胞分析
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目前已上市了600多种蛋白提取试剂盒（动物、植物、细菌、昆虫、酵母等样本及细胞器提取）及上千种的细胞检测的相关产品-细胞凋亡、增殖毒性、细胞周期、膜电位检测、细胞器荧光探针、活性氧ROS检测、细胞自噬、细胞耗氧OCR、细胞外酸化率ECAR、缺氧检测、粘附检测、钙离子检测、膜通透性转换孔检测、膜流动性检测、外泌体、囊泡提取等。
详细信息
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
1.长期不用可以-20℃保存。
2.避免反复冻融。多次冻融会导致失效。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
4.试剂A低温保存后可能会有结晶析出，可以置室温摇匀溶解或者37℃水浴溶解摇匀。
2.避免反复冻融。多次冻融会导致失效。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
4.试剂A低温保存后可能会有结晶析出，可以置室温摇匀溶解或者37℃水浴溶解摇匀。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
蛋白质、抗体等
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.生理盐水
2.纯水
3.蛋白定量试剂盒
2.纯水
3.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.比色皿
2.试管
3.吸头
4.一次性手套
2.试管
3.吸头
4.一次性手套
使用注意事项
1.试剂A低温保存后可能会有结晶析出，可以置室温摇匀溶解或者37℃水浴溶解后摇匀再使用。
2.试剂B2干粉开盖使用前先敲入瓶底部，防止开盖时洒落导致损失。
2.试剂B2干粉开盖使用前先敲入瓶底部，防止开盖时洒落导致损失。
使用方法
1. 试剂配制：
使用前，准确吸取10ml试剂B1加入试剂B2干粉，充分溶解混匀，即成试剂B工作液，4℃避光保存备用。
2. 样本处理
蛋白质/抗体等液体样本：直接检测或稀释后检测。
3. 总巯基的测定
按下表在试管中加入试剂，同时做空白管（无样品液）、样品对照管。
【注】：
空白管做一个即可，对照管每个样品均要做。
充分混匀，置室温静置10分钟。412nm，0.5cm光径，测定各管OD值。
【注】：
如果OD值太大，可以将样品用试剂A稀释后再检测。
4. 计算
总巯基含量（mmol/g）
=（测定管吸光度-空白管吸光度-对照管吸光度）÷14.15÷0.5×10÷蛋白含量（mg/ml）
【注】：
以上以0.5cm光径检测设备为例，如果实际使用的检测设备是采用1cm光径，将计算公式中的0.5换成1即可。
【注】：
14.15mM/cm为毫摩尔消光系数；
0.5cm为光径；
10为反应总体积/样品取样量
使用前，准确吸取10ml试剂B1加入试剂B2干粉，充分溶解混匀，即成试剂B工作液，4℃避光保存备用。
2. 样本处理
蛋白质/抗体等液体样本：直接检测或稀释后检测。
3. 总巯基的测定
按下表在试管中加入试剂，同时做空白管（无样品液）、样品对照管。
【注】：
空白管做一个即可，对照管每个样品均要做。
充分混匀，置室温静置10分钟。412nm，0.5cm光径，测定各管OD值。
【注】：
如果OD值太大，可以将样品用试剂A稀释后再检测。
4. 计算
总巯基含量（mmol/g）
=（测定管吸光度-空白管吸光度-对照管吸光度）÷14.15÷0.5×10÷蛋白含量（mg/ml）
【注】：
以上以0.5cm光径检测设备为例，如果实际使用的检测设备是采用1cm光径，将计算公式中的0.5换成1即可。
【注】：
14.15mM/cm为毫摩尔消光系数；
0.5cm为光径；
10为反应总体积/样品取样量
常见问题分析
1.巯基含量低于预期？
可能是样品中的游离巯基已经被氧化。
需要限度地减少样品制备与分析之间的时间间隔，尽快完成分析测定。可以在样品中加入1-5mM 的EDTA以螯合可能氧化巯基的二价金属离子。
可能是样品中的游离巯基已经被氧化。
需要限度地减少样品制备与分析之间的时间间隔，尽快完成分析测定。可以在样品中加入1-5mM 的EDTA以螯合可能氧化巯基的二价金属离子。
参考文献
1.Han-QuanWen, et al.
Enhanced photo-fermentative hydrogen production by synergistic effects of formed biofilm and added L-cysteine
Renewable Energy 2019
2.Yan Yan, et al.
Nanosized functional miRNA liposomes and application in the treatment of TNBC by silencing Slug gene
International Journal of Nanomedicine 2019
3.Guojie Wu, et al.
Preparation of Selenium-Enriched Yeast by Re-Using Discarded Saccharomyces cerevisiae from the Beer Industry for Se-Supplemented Fodder Applications
Applied Sciences 2019
4.Sun, Meng-Ge, et al.
Targeting Epirubicin Plus Quinacrine Liposomes Modified with DSPE-PEG2000-C(RGDfK) Conjugate for Eliminating Invasive Breast Cancer
Journal of Biomedical Nanotechnology 2015
Enhanced photo-fermentative hydrogen production by synergistic effects of formed biofilm and added L-cysteine
Renewable Energy 2019
2.Yan Yan, et al.
Nanosized functional miRNA liposomes and application in the treatment of TNBC by silencing Slug gene
International Journal of Nanomedicine 2019
3.Guojie Wu, et al.
Preparation of Selenium-Enriched Yeast by Re-Using Discarded Saccharomyces cerevisiae from the Beer Industry for Se-Supplemented Fodder Applications
Applied Sciences 2019
4.Sun, Meng-Ge, et al.
Targeting Epirubicin Plus Quinacrine Liposomes Modified with DSPE-PEG2000-C(RGDfK) Conjugate for Eliminating Invasive Breast Cancer
Journal of Biomedical Nanotechnology 2015
