起订量:
外周血分离PBMC用于细胞培养实验服务
中级会员第5年
生产厂家上海达为科生物科技有限公司,位于上海长江软件园,公司目前具备较好的生物学、医学技术服务平台,能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。
公司拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员(博士后)2人,助理研究员(博士)4人,核心研究员(硕士)15人,主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。通过高度细分、较好的服务平台,为广大客户提供了完善的技术解决方案和服务。目前,,涉及临床医学、肿瘤生物学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学、医学等诸多领域。
我们的目标是为了使您的工作更轻松、更快捷。为了实现一站式服务我们不断更新实验方法和引进新的产品,控制和降低各种成本,为您的研究加油。这既是一项长期而艰巨的工作,又是一项光荣的工作,同时也是我们企业发展的动力源泉。
外周血分离PBMC用于细胞培养实验服务
外周血分离PBMC(Peripheral Blood Mononuclear Cells,外周血单个核细胞)是免疫学研究中的一项常规技术。
以下是基于最新信息的实验步骤:
1.血液采集与抗凝:首先,使用含有肝素的抗凝管采集新鲜外周静脉血。
2.血液稀释:按照1:1的比例将抗凝全血与稀释洗涤液(如PBS或RPMI-1640)混合,以降低血液的粘稠度,便于后续操作。
3.密度梯度离心:向无菌离心管中加入适量的Ficoll密度梯度分离液,将稀释后的血液样品小心地置于分离液上方,保持两液面界面清晰。离心条件一般为800g,室温下离心20-30分钟。
4.收集PBMC:离心后,血浆层位于上层,PBMC层(白色薄膜)位于中间,红细胞层位于下层。使用移液枪或吸管小心吸取PBMC层,转移至新的离心管中。
5.洗涤细胞:向含有PBMC的离心管中加入适量的稀释洗涤液,低速离心去除血浆和Ficoll,重复洗涤1-2次以净化细胞。
6.重悬细胞:洗涤后,用稀释洗涤液重悬PBMC,计数细胞数量,并根据需要进行后续实验。
外周血分离PBMC用于细胞培养实验服务注意事项
1.使用新鲜血液进行分离,以保证细胞活性。
2.整个操作过程应轻柔,避免对细胞造成机械性损伤。
3.离心速度和时间应严格控制,以确保有效分离而不破坏细胞结构。
4.使用电子束灭菌的分离管和无热源、无核酸酶的试剂,以保证实验的准确性和细胞的完整性。
以上步骤结合了最新的实验操作指南和技术建议,确保了实验的时效性和准确性。在进行实验时,应遵循最新的实验协议和安全指南。