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Thermo Scientific Phire热启动II DNA聚合酶
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详细信息
- Phire® 热启动II DNA聚合酶的性能超越了市场上所有的Taq热启动聚合酶。它反应速度更快，性能更强劲，可以对长片段进行高产量的PCR扩增。这些优点均来源于的蛋白质工程技术的改造。Phire热启动II DNA聚合酶带有一个的双链DNA结合域，这个结合域可以极大的提高酶与DNA的结合效率，从而缩短延伸时间 (10-15s /kb)，增进产量，且与Taq DNA聚合酶相比，保真度提高了2倍。此外，的热启动技术使该酶在标准循环温度下即可激活，无需额外处理，实现“零时间”激活。这些优点使Phire热启动II DNA聚合酶成为常规和高通量PCR的理想选择。Phire在多种PCR仪上均显示了的性能，包括传统的热循环仪，以及如Piko热循环仪这样的快速PCR仪。
优点：
■ 快速热启动：无需额外激活步骤
■ 快速酶反应：扩增速度是热启动Taq酶的4倍
■ 性能强劲：对抑制剂的耐受程度高，减少了优化步骤
■ 高产量：高效带来高产量
■ 更长的PCR产物：与任何热启动Taq酶相比，可以扩增更长的DNA片段
应用：
■ 热启动PCR
■ 常规PCR
■ 非高保真PCR
■ 快速PCR
■ 高通量PCR
完整的PCR实验方案耗时少于传统反应的一半（图1）
将来自五个厂家的热启动DNA聚合酶分别用于扩增一段600bp的人类基因组DNA片段。与化学修饰或使用抗体热启动技术的Taq DNA聚合酶(供应商A-D)相比，使用Phire热启动II DNA聚合酶，PCR实验最多可以快四倍。
更短时间内获得超高产量（图2）
将来自五个厂家的热启动DNA聚合酶用于扩增1.5kb的人类cathepsin K基因。仅用29分钟，Phire热启动II DNA聚合酶即可扩增得到大量的目标PCR产物。相比之下，其他四个重要厂家提供的热启动Taq DNA聚合酶（A-D）不仅耗时长，而且产量偏低。
几种高性能酶对比：
| 对比项目 | Phusion高保真DNA聚合酶 | Phusion热启动II高保真DNA聚合酶 | Phusion Flash高保真DNA聚合酶 | Phire热启动IIDNA聚合酶 | |
| 特点 | 平端或3’A端 | 平端 | 平端 | 平端 | 平端 |
| 目标片段长度 | ≤ 20 kb | ≤ 20 kb | ≤ 20 kb | ≤ 7.5 kb | |
| 热启动 | 否 | 是 | 是 | 是 | |
| 推荐延伸时间 | 15-30 s/kb | 15-30 s/kb | 15 s/kb | 10-15 s/kb | |
| 校正功能 | 是 | 是 | 是 | 一般 | |
| 保真度 vs. Taq | 52x | 52x | 25x | 2x | |
| 形式 | 单酶 1 | √ | √ | - | √ |
| Master mix 2 | √ | - | √ | - | |
| 试剂盒 3 | √ | - | - | - | |
2. Master Mix：2X master mix
3. 试剂盒：所有必需的PCR反应成分包括对照模板和引物
订购信息：
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| F-122S | Phire热启动II DNA聚合酶 | 200 x 50μl rxns (或 500 x 20μl rxns) |
| F-122L | Phire热启动II DNA聚合酶 | 1000 x 50μl rxns (或 2500 x 20μl rxns) |
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